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草莓黄单胞菌RPA-LF快速检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 史春佳;李刚;刘林川;秦梦瑶;刘丽锋;宋艳红;赵霞;周厚成

作者机构：

关键词： 草莓黄单胞菌;RPA-LF检测;田间;早期诊断

期刊名称：中国果树

ISSN： 1000-8047

年卷期： 2024 年 04 期

页码：

收录情况： 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 建立一种适用于田间稳定、快速、准确地检测草莓黄单胞菌的技术方法，有助于该病原菌的早期诊断和有效控制。将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和胶体金侧流层析试纸条技术(lateral flow strip,LF)相结合。根据草莓黄单胞菌的限制性核酸内切酶亚基S基因序列保守区设计RPA特异引物及探针，通过对反应条件优化及对灵敏性、特异性与疑似样本的分析，成功建立了草莓黄单胞菌RPA-LF检测方法。该方法最佳反应条件为39℃恒温反应10 min，最低检测限为1.0×101 copies/μL，能够特异地检测出草莓黄单胞菌，从采集疑似症状植株到检测可在30 min内实现，而且用RPA-LF方法检测疑似样本结果与常规PCR检测方法一致。综上，建立的草莓黄单胞菌RPA-LF检测方法快速、简单、准确、可视化，可用于该病原菌的早期诊断。

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