5种苹果病毒多重PCR检测体系的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 胡国君;范旭东;李军;任芳;孙喜陈;张尊平;董雅凤
作者机构:
关键词: 苹果;苹果褪绿叶斑病毒;苹果茎沟病毒;苹果茎痘病毒;苹果坏死花叶病毒;苹果锈果类病毒;多重PCR
期刊名称:中国果树
ISSN: 1000-8047
年卷期: 2023 年 10 期
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础.分别设计了 ACLSV、ApNMV和ASSVd 3种病毒的检测引物ACL-F1/R1、ApN-F2/R2和ASS-F1/R1,片段的大小分别为1 112、1 025、213 bp.利用新设计和已报道的苹果病毒特异性引物,通过引物检测效果比较、组合筛选、用量优化及退火温度调试,建立了 5种苹果病毒多重PCR检测体系.该检测体系的扩增片段大小分别为 ACLSV 1 112 bp、ApNMV 640 bp、ASGV 449 bp、ASPV 349 bp 和 ASSVd 213 bp.利用多重 PCR和单一 PCR分别对50份田间苹果样品进行病毒检测,结果显示,各样品多重PCR检测与单一 PCR检测结果一致,表明本研究建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、高效地检测单一或复合侵染的5种苹果病毒.
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