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湖羊胚胎来源成肌细胞的培养方法改良与特性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘璐璐;胡文萍;尚明玉;王欣悦;冯勉;刘运辉;熊金珂;张莉

作者机构：

关键词： 湖羊;骨骼肌;成肌细胞

期刊名称：基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2021-2022年度） ; ; 科技核心（2021版）

摘要： 为获得湖羊（Ovis aries）胚胎来源骨骼肌成肌细胞,本研究采集72日龄湖羊胚胎四肢骨骼肌组织,并对现有细胞培养技术进行改良和比较,结合差速贴壁法分离和纯化湖羊骨骼肌成肌细胞,对分离获得的骨骼肌成肌细胞进行鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的改良方法可高效获得湖羊胚胎来源骨骼肌成肌细胞,获得的细胞具有较强的增殖能力,可连续培养30代仍保持正常细胞形态。利用低浓度马血清培养体系,可成功诱导湖羊骨骼肌成肌细胞向肌管分化,同时培养至第10代时肌管数量显著增加。RT-qPCR检测结果表明,骨骼成肌细胞标志性基因PAX7、MYOD、desmin和MYOG均表达,且随传代次数增加表达量逐渐降低;培养至第10代时MYF5基因表达量显著增加。细胞免疫荧光结果表明,第28代骨骼肌成肌细胞标志蛋白横纹肌辅肌动蛋白α（αsarcomericactin）基因表达。综上所述,本研究采用的改良方法高效可靠,可满足较高纯度湖羊骨骼肌成肌细胞的分离纯化和培养,并为其他动物骨骼肌成肌细胞的分离纯化和培养提供依据和参考。

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