禽源磷脂翻转酶ATP11c基因敲除细胞系的构建及其对新城疫病毒复制的影响
文献类型: 中文期刊
作者: 张丹丹;王飞;解佳楠;仇旭升;宋翠萍;孙英杰;廖瑛;丁铲;谭磊
作者机构:
关键词: 新城疫病毒;磷脂翻转酶ATP11c;磷脂酰丝氨酸;CRISPR-Cas9;病毒复制
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 新城疫病毒(NDV)作为严格依赖宿主细胞完成生命周期的副黏病毒科成员,其组装与出芽过程高度关联宿主细胞膜微环境重构。研究表明,NDV感染可诱导宿主细胞凋亡并造成质膜内侧磷脂酰丝氨酸(PS)异常外翻,而P4-ATPase家族成员ATP11c作为特异性磷脂翻转酶,负责转位PS至质膜胞质侧维持正常分布。本研究基于CRISPR-Cas9基因编辑技术成功构建了ATP11c基因稳定敲除的DF-1细胞系,系统探究其调控NDV复制的分子机制。基因测序及Western blot检测结果表明该细胞系实现ATP11c蛋白的完全缺失,Western blot分析显示敲除株中NDV子代病毒产量显著降低(p<0.01)。进一步分析发现,ATP11c缺失通过抑制caspase介导的膜不对称性破坏,有效延缓PS外翻进程从而削弱病毒粒子的成熟释放。此研究首次揭示磷脂翻转酶ATP11c在调控NDV感染周期中的生物学功能,为深入解析NDV感染机制和宿主-病毒互作提供了重要理论依据。
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