文献类型： 中文期刊
作者： 谭书桢;董虎;潘颂佳;穆素雨;陈永杰;张韵;孙世琪;郭慧琛
作者机构：
关键词： 重链抗体可变区抗体;信号肽;密码子优化;表达
期刊名称：生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2024 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版）
摘要： 重链抗体可变区抗体（variable domain of heavy-chain antibody， VHH）已被广泛用于药物治疗、诊断和研究。大肠杆菌是生产VHH最常用的表达系统，但可能会导致VHH的生物活性降低。哺乳动物细胞是目前最理想的VHH表达宿主之一。本研究分别通过优化VHH的信号肽（signal peptide， SP）和密码子，以期提高VHH在Expi293F细胞中的产量。VHH1-Fc被用于筛选SP，通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）筛选出的SP IFN-α2分泌效果最佳；通过提高基因的GC3和GC含量，VHH1的产量提高了约1倍，且不明显影响VHH1与A型塞内卡病毒（Senecavirus A， SVA）的结合活性；其他5种重组VHHs分别连接SP IFN-α2并进行密码子优化，其平均产量大于191.6 mg/L。此外，这些VHHs在培养上清中具有高纯度和高回收率。本研究证实了SP IFN-α2和密码子优化可以在Expi293F细胞高效表达VHH，为VHH的大规模生产提供参考。
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