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基于CRISPR-Cas9技术的鸡成纤维细胞系全基因组敲除文库的建立与初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 徐娟;刘忠媛;刘彦峰;廖瑛;仇旭升;宋翠萍;谭磊;刘玮炜;孙英杰;丁铲

作者机构：

关键词： CRISPR-Cas9文库筛选;DF-1细胞;新城疫病毒（NDV）;c-C基序趋化因子类26

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： CRISPR-Cas9（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9， CRISPR-Cas9）已被广泛证实是高效强大的第三代基因编辑工具。高通量且系统无偏的靶向全基因组水平编辑技术的应用对充分理解基因功能具有重要的意义。基于CRISPR-Cas9技术的大规模筛选方法已在哺乳动物研究领域取得重要进展，尽管鸡全基因组测序的工作已完成，但至今尚未有关于禽类CRISPR-Cas9文库的研究，严重限制了对其基因功能的解析。本研究利用CRISPR-Cas9技术构建鸡成纤维细胞系（DF-1）细胞全基因组敲除文库，并利用新城疫病毒（Newcastle disease virus， NDV）感染DF-1文库细胞，经过高通量测序筛选到sgRNA富集程度排名前10的影响NDV复制的关键宿主因子。该研究首次构建了鸡CRISPR-Cas9文库筛选模型，为进一步研究家禽免疫学、病毒学等提供强大高效的工具。

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  • 相关文献

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[2]柔嫩艾美耳球虫丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶真核表达质粒的构建及其在DF-1细胞中的表达. 朱雪龙,黄兵,韩红玉,赵其平,朱顺海. 2016

[3]鸡毒支原体S6株P25蛋白粘附特性的研究. 高利萍,李媛,周长平,刘素丽,邵家日,王琪,陈莹,王显兵,辛九庆. 2016

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[5]柔嫩艾美耳球虫沉默信息调节因子2真核表达质粒的构建及在细胞中的表达. 杨斯涵,赵其平,韩红玉,朱顺海,李莎,翟颀,梁思婷,杨亮宇,黄兵. 2015

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