RUBY无创筛选系统在黄瓜遗传转化中的应用
文献类型: 中文期刊
作者: 李雯静;李旭彤;辛同旭;柴森;王帅;杨学勇
作者机构:
关键词: RUBY;黄瓜;遗传转化;无创筛选;甜菜红素
期刊名称:中国蔬菜
ISSN: 1000-6346
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: RUBY报告系统是一种天然无害、观察方便、成本节约的新型筛选标记工具。为了提高黄瓜的遗传转化筛选效率,实现对阳性植株的裸眼筛查,将RUBY序列构建到表达载体,在黄瓜和烟草中进行了农杆菌介导的瞬时表达,利用蛋白质免疫印迹试验探究了该系统在黄瓜中无法工作的原因;通过优化载体、2A连接肽和RUBY序列,将优化后的载体进行黄瓜遗传转化的稳定测试。结果发现,原RUBY系统在黄瓜中无法正常使用,通过将RUBY系统中的P2A连接肽更替为F2A,优化了RUBY序列和去除GFP表达盒的抑制,并将优化载体pCambia1305.4-fRUBY-ΔGFP应用于黄瓜遗传转化后,成功诱导黄瓜中合成甜菜红素并获得了RUBY阳性植株。RUBY系统在黄瓜中的建立,为提高黄瓜的遗传转化筛选效率奠定了重要的技术基础。
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