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H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 张洁;崔鹏飞;张元成;邢鑫;王丛丛;颜成;王燕;陈源;朱春成;缪葭皓;陈素娟;邓国华;陈化兰

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;杆状病毒表达系统;N1蛋白;血清抗体

期刊名称：中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白，将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1，构建的重组转移载体pFastBac1-N1转化至DH10Bac感受态细胞，经过蓝白斑筛选获得阳性重组杆粒rBacmid-N1，然后将重组杆粒转染至sf9昆虫细胞，获得N1亚型重组杆状病毒。结果显示：N1重组蛋白在sf9昆虫细胞中正确表达，并且该重组蛋白具有良好的反应原性，能够与N1蛋白单克隆抗体3F3发生特异性反应，其仅能识别N1亚型鸡血清，特异性较好。研究成功制备了N1重组蛋白，为NA蛋白表达方法提供参考并为临床血清样品的N1抗体检测方法的建立奠定基础。

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