苹果坏死花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 胡国君;张尊平;范旭东;任芳;马勉娣;张秀英;鲁兴凯;董雅凤
作者机构:
关键词: 苹果 ; 苹果坏死花叶病毒 ; 实时荧光定量PCR ; 常规PCR
期刊名称:中国果树
ISSN: 1000-8047
年卷期: 2021 年 05 期
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 根据GenBank数据库已登录序列设计了12对苹果坏死花叶病毒(apple necrotic mosaic virus,ApNMV)的检测引物,通过引物筛选和体系优化,建立了以ApN1-F3/R3为引物的ApNMV的TB Green染料法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测技术。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为97.3%,相关系数为0.997,灵敏度是常规PCR的100倍。采用q PCR方法对60份田间苹果样品进行检测,结果显示,常规PCR对ApNMV的检出率为51.7%,而qPCR的检出率为56.7%。该技术适用于田间样品的检测。
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