伪狂犬病毒gB蛋白纯化及单克隆抗体的制备
文献类型: 中文期刊
作者: 焦爽;李长尧;张朝霞;翁长江;熊涛
作者机构:
关键词: 伪狂犬病毒;gB基因;昆虫杆状病毒;单克隆抗体
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2023 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病毒(PRV)gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化,并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体(mAb)。小鼠经三次免疫后,利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价,并将抗体效价达到2×104以上的小鼠进行细胞融合。随后通过iELISA和IFA实验对阳性杂交瘤细胞进行筛选。经3-4次亚克隆筛选后,得到了一株可以稳定分泌gB mAb的杂交瘤细胞株293。同时,对其进行亚类鉴定发现该株细胞分泌的抗体类型为IgM型。本研究为建立新型ELISA检测试剂盒、新型疫苗的开发以及后续中和抗体的研究提供了良好的生物材料。
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