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蛋白激酶PKR在HeLa细胞中的过表达及其siRNA干扰的鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 吴娜;赵志荀;吴国华;颜新敏;叶奕优

作者机构：

关键词： 羊痘病毒;PKR基因;真核表达;siRNA;HeLa细胞

期刊名称：黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2016 年 09 期

页码： 43-47

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)信号通路对羊痘病毒复制的影响,试验构建了PKR基因的真核表达载体,并在He La细胞中实现了PKR的过表达;从相关文献中筛选了靶向PKR的2对siRNA,检测其对PKR的干扰效果,以RT-PCR方法扩增PKR基因,克隆入表达载体pc DNA3.1(-)/Myc-His(B),对重组质粒进行双酶切及测序鉴定,将阳性重组质粒或siRNAs分别转染He La细胞,Western-blot检测PKR蛋白的表达水平。结果表明:试验成功构建了PKR基因的真核表达载体pc DNA3.1(-)-PKR,重组质粒在He La细胞中得到了表达;2对siRNA具有较好的干扰效果,其中siRNA1、siRNA2对PKR的干扰效率分别达到76%和52%。

分类号： S852.654`Q78

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