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羊支原体肺炎病原三重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 吕皓晴;刘颖;张粟子;刘立元;颜新敏;郝华芳;储岳峰;许健;袁律峰

作者机构：

关键词： 羊支原体肺炎;多重PCR;绵羊肺炎支原体;山羊支原体山羊肺炎亚种;丝状支原体山羊亚种

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 羊支原体肺炎是由多种支原体引起的一类疾病的总称，在我国报道的病原主要包括绵羊肺炎支原体（Mo）、山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）和丝状支原体山羊亚种（Mmc）等。为了建立一种能够快速鉴别Mo、Mccp、Mmc的方法，本研究通过基因组共线性分析，鉴定3种羊支原体基因组特异性区间，设计了3种羊支原体特异性引物共计87条，从中筛选出一套三重PCR检测引物，建立了Mo、Mccp、Mmc三重PCR检测方法，对该方法进行优化后，开展特异性、灵敏度试验以及临床样本检测。结果显示，利用筛选出的最适引物组合建立了多重PCR检测方法，能特异性扩增出3个目的条带：Mo（467 bp）、Mccp（668 bp）、Mmc（310 bp），探索出最佳延伸时间和退火温度分别为10 s和56 ℃，与牛结核分枝杆菌、布鲁氏菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌等其他病原无交叉反应；对构建的阳性标准质粒的最低检测拷贝数分别为102 copies/μL、101 copies/μL和102 copies/μL。结果表明，本研究建立的三重PCR方法可用于Mo、Mccp、Mmc感染的快速鉴别诊断及流行病学调查，具有临床便捷、诊断快速的特点。

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