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黄牛朊蛋白原核表达产物的复性与活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 呼志斌;吴润;刘湘涛;陈建华;赵春林

作者机构：

关键词： 牛朊蛋白;原核表达;复性;活性分析

期刊名称：兰州大学学报(医学版)

ISSN： 1000-2812

年卷期： 2010 年 04 期

页码： 16-20

摘要： 目的复性黄牛朊蛋白原核表达产物,分析复性蛋白的活性,以获得有活性的牛重组朊蛋白。方法构建并诱导表达黄牛朊蛋白基因重组菌,复性其包涵体裂解物,对GST-BoPrP(93～241)(Q234R)复性产物进行GSTrap FF柱层析纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹观察其提纯和复性效果。结果重组菌可表达分子质量约为42.4 ku的目的蛋白,包涵体裂解物经过透析复性后,可获得较高纯度的复性目的蛋白。各复性产物和纯化的GST-BoPrP(93～241)(Q234R)蛋白经免疫印迹鉴定,发现仅分子质量约为42.4 ku的条带与单抗4C11结合。结论获得高纯度复性黄牛朊蛋白原核表达蛋白,具有良好的免疫反应活性。

分类号： S852.5

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