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宿主蛋白Ambra 1介导非洲猪瘟病毒MGF360-9L抑制其复制的机制

文献类型： 中文期刊

作者： 杨金柯;郝雨;杨博;史喜绢;杨行;张大俊;赵登率;闫文倩;陈玲玲;别鑫恬;陈国辉;申超超;刘湘涛;郑海学;张克山

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;MGF360-9L;Ambra 1;蛋白互作

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： MGF360-9L是非洲猪瘟病毒（African swine fever virus， ASFV）重要的毒力基因，本实验室前期使用免疫共沉淀和液相色谱-质谱（IP-MS）联合技术，明确了MGF360-9L和宿主蛋白自噬/苄氯素1调节因子1（autophagy/beclin-1 regulator 1，Ambra 1）具有相互作用，现有的研究已经证实宿主蛋白Ambra 1在病原感染中发挥重要作用。为明确Ambra 1介导MGF360-9L对ASFV复制的调控作用及其机制，本研究构建Ambra 1真核表达质粒，使用免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）和间接免疫荧光（indirect immunofluorescence assay，IFA）技术，验证了Ambra 1和MGF360-9L的互作及互作区域。设计并合成Ambra 1的RNA干扰（RNAi）序列，运用实时荧光定量PCR（real-time qPCR， RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western-blot）技术，证明了Ambra 1过表达抑制ASFV复制，下调Ambra 1的表达则能够促进ASFV复制。此外也证明了Ambra 1剂量依赖性降解MGF360-9L蛋白。总之，本研究明确了宿主蛋白Ambra 1介导ASFV MGF360-9L抑制其复制的初步机制。该研究丰富了ASFV蛋白与宿主蛋白之间的互作调控网络，为进一步研究ASFV-宿主相互作用积累了数据。

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