一株口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的表位肽段鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 王娜;卢曾军;曹轶梅;李平花;付元芳;孙普;曾巧英;刘在新
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;单克隆抗体;抗原表位
期刊名称:动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2014 年 10 期
页码: 11-13
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为鉴定口蹄疫病毒非结构蛋白3A的单克隆抗体3A24#识别的表位区,对非结构蛋白3A分两个肽段进行原核表达,其中3A1和3A2肽段分别包含3A蛋白的第1位~89位和77位~153位氨基酸。分别针对两肽段基因设计并合成引物,PCR扩增后定向克隆到原核表达载体pET-30a(+)-PES-SUMO,将重组质粒转化宿主菌E.coli BL21(DE3)pLys,IPTG诱导表达。用单克隆抗体3A24#对表达的3A1和3A2肽段进行Western blot检测,以鉴定单克隆抗体3A24#的识别表位肽。SDS-PAGE分析表明,成功表达了3A1和3A2肽段,大小分别为26ku和25ku。Western blot分析表明,FMDV牛阳性血清与两肽段均能识别,而单克隆抗体3A24#只能与3A2肽段发生反应,与3A1肽段不发生反应。3A24#单克隆抗体识别的抗原表位位于3A2肽段,即3A蛋白的第89aa~第153aa肽段上。
分类号: S852.659.6
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