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大肠杆菌表达的重组猪源G-CSF在小鼠上的生物学活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘丽萍;刘云;虞凌雪;李国新;倪迎冬

作者机构：

关键词： 猪粒细胞集落刺激因子;原核表达;生物活性检测

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 粒细胞集落刺激因子（G-CSF）是一种多肽类生长因子，其主要作用是促使大量骨髓前体细胞的动员。G-CSF 具有良好的生物活性，被广泛用于免疫学研究。在本研究中，通过对猪源粒细胞集落刺激因子（PG-CSF）基因进行密码子优化，构建了重组质粒pColdI-PG-CSF。将pColdI-PG-CSF转染到大肠杆菌BL21（DE3）中，用 IPTG诱导重组猪粒细胞集落刺激因子的表达并纯化。SDS-PAGE电泳和Westernblot分析结果显示，重组蛋白的分子量约为 21.4kDa，主要以包涵体形式存在。该重组蛋白经 Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后，用MTT法在 M-NFS-60 细胞上检测了其生物活性，达到 5.95238×105 IU/mg。用10万IU/kg剂量皮下注射6-8周龄BALB/c小鼠，与对照小鼠相比，试验小鼠白细胞和中性粒细胞数量显著提升。综上所述，本研究用大肠杆菌表达的猪源G-CSF 具有良好的生物活性，是猪免疫学研究良好的生物材料，也有潜力开发为治疗猪免疫抑制性疾病的新产品。

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