猪繁殖与呼吸综合征病毒GP2蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 尤尚尚;王俊娜;罗灵芝;赵培森;虞凌雪;李国新
作者机构:
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;GP2蛋白;单克隆抗体;抗原表位
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP2蛋白单克隆抗体,本研究使用大肠杆菌表达系统表达并纯化了GP2蛋白。用该蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选到了1株稳定分泌GP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2G10C3)。IFA结果显示2G10C3能与表达GP2的Marc-145细胞系发生特异性反应。而且与NADC30、HuN4、CH-1a和VR2332等不同亚型的PRRS毒株也发生反应。通过表达重叠截短蛋白与单克隆抗体的反应性分析鉴定出2G10C3针对的表位为133EATLSRI139,是一个新发现的细胞表位。氨基酸比对分析发现,该表位在美洲型毒株中较为保守,蛋白质建模及可视化分析显示其以α螺旋的形式存在蛋白结构表面,可能是GP2蛋白的优势表位。本研究获得的单克隆抗体为PRRSV GP2蛋白的功能研究及诊断试剂盒的开发提供了良好的工具。
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