PDCoV N基因TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 马翮斯;罗灵芝;王元红;虞凌雪;李国新
作者机构:
关键词: 猪;猪德尔塔冠状病毒;核衣壳基因;TaqMan qPCR;仔猪腹泻
期刊名称:中国猪业
ISSN: 1673-4645
年卷期: 2025 年 20 卷 5 期
页码:
收录情况: 农林核心(2024版)
摘要: 猪德尔塔冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是一种对哺乳仔猪致病性较强的病原体,感染后可导致急性水样腹泻、呕吐以及高死亡率(30%-50%),对全球养猪业危害严重。为建立一种灵敏且准确的PDCoV检测方法,本研究基于PDCoV N基因的保守序列设计特异性引物和探针,优化反应体系,成功构建了一种TaqMan荧光定量PCR(qPCR)检测方法。以PDCoV N基因重组质粒作为标准品,该方法在8.79×10^(1)-8.79×10^(8) copies/μL范围内线性关系良好(R^(2)=0.997,斜率=-3.236),最佳引物和探针浓度分别为0.4μmol/L和0.2μmol/L。结果显示,该方法敏感性高,最低检测限为8.79 copies/μL;特异性强,与猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)均无交叉反应;重复性好,组间变异系数和组内变异系数均小于1.5%。本研究建立的qPCR方法可为PDCoV的临床检测和流行病学调查提供可靠的技术支撑。
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