文献类型： 中文期刊
作者： 董丽丽;许鑫燕;刘迪;郑亚婷;康洪涛;姜骞;杨鸣发;刘家森;曲连东
作者机构：
关键词： 猫细小病毒 ; 适配体 ; SELEX技术
期刊名称：中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2021 年 43.0 卷 8.0 期
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）
摘要： 为筛选猫细小病毒(FPV)特异性核酸适配体,本研究利用体外指数富集的配体系统进化技术(SELEX),从80nt的单链DNA随机文库中筛选出与FPV高亲和力、高特异性结合的核酸适配体.对FPV适配体共进行14轮筛选,采用dotblot鉴定,确定其中的Apt27和Apt52为候选适配体.MTT试验表明,Apt27和Apt52对CRFK细胞(猫肾细胞)无毒性作用.利用酶联寡核苷酸法(ELONA)测定Apt27和Apt52的解离常数,结果显示分别为 18.3249±7.1723 nmol/L 和24.7882±10.0067nmol/L.同时采用 dot blot、间接免疫荧光试验(IFA)方法检测 Apt27和Apt52对不同病毒的结合情况,结果显示其对猫杯状病毒、猫疱疹病毒的结合力弱,而对FPV的结合能力较强.预测二者二级结构可见,Apt27和Apt52均具有环状、发卡状结构,其中茎环结构可能为适配体特异性识别FPV的基本结构.本研究首次筛选到特异性识别FPV的适配体序列,为FPV的检测与治疗制剂的开发提供了新思路.
分类号：
- 相关文献
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