口蹄疫病毒A型AF/72株衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 张庆勋;刘新生;方玉珍;王永录;张永光
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;衣壳蛋白;检测
期刊名称:安徽农业科学
ISSN: 0517-6611
年卷期: 2015 年 26 卷 26 期
页码: 21-23+72
摘要: 通过限制性酶切位点将P12A和3C基因插入到带有双启动子(Pp10和PPH)的杆状病毒表达载体p Fast BacTMDual,转化E.coli DH10感受态细胞进行蓝白斑筛选,将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒r Bac-Dual-P12A3C,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)检测衣壳蛋白的表达。IFA结果表明表达产物能够被A型FMDV猪抗阳性血清所识别,鉴定正确并具有良好反应原性。Western-blot检测到81 k D(P12A)、57 k D(VP0+VP3)、47 k D(VP3+VP1)、33 k D(VP0)和24 k D(VP1/VP3)5条蛋白条带,与预期相符。该研究为进一步研究A型口蹄疫病毒空衣壳的体外组装提供了试验依据。
分类号: S852.65
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