文献类型： 中文期刊
作者： 仝力心;芦延珍;于瑞明;张莉萍;刘霞;王永录;杜晓华;刘新生
作者机构：
关键词： 猪德尔塔冠状病毒;猪流行性腹泻病毒;pdRBD-peRBD融合蛋白;亚单位疫苗
期刊名称：生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2024 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版）
摘要： 为了研发出一种可同时预防猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus， PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus， PEDV)两种病毒病的有效二联亚单位疫苗，本研究将PDCoV受体结合域(receptor binding domain， RBD)与PEDV RBD基因进行串联，构建至真核表达载体pCDNA3.1(+)中，利用哺乳动物细胞ExpiCHO?表达系统表达纯化出PDCoV-RBD-PEDV-RBD(简写为pdRBD-peRBD)融合蛋白，以3种不同剂量(10、20和30 μg)免疫小鼠，并设置PBS对照组，利用ELISA和流式细胞术评估该融合蛋白诱导的体液免疫反应和细胞免疫反应，利用病毒微量中和试验测定免疫小鼠血清对PDCoV或PEDV的中和效价。结果表明，3个不同剂量组在加强免疫后均诱发了高水平的IgG抗体，不同剂量组间抗体水平没有明显差异，说明10 μg的免疫剂量即可达到最佳免疫效果。流式细胞术检测结果显示，免疫组的CD3+CD4+阳性细胞比例显著升高，CD3+CD8+阳性细胞比例相对较低，这符合亚单位疫苗主导机体产生体液免疫反应的预期。同时对血清中细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ的含量进行了检测。结果证明了该融合蛋白诱导了良好的体液免疫效果，同时还产生了一定的细胞免疫应答。中和试验结果表明，10 μg免疫剂量所诱导的抗体即可在体外有效中和PDCoV和PEDV两种病毒，效价分别为1:179.25和1∶141.21。上述研究结果表明，pdRBD-peRBD融合蛋白10 μg免疫剂量即可诱导高水平的体液免疫反应，诱导的抗体可同时中和PDCoV和PEDV两种病毒，说明pdRBD-peRBD融合蛋白有希望成为一种能同时预防PDCoV和PEDV的有效二联亚单位疫苗。
分类号：
- 相关文献
[1]国内首株猪德尔塔冠状病毒(Porcinedeltacoronavirus)的分离鉴定. 陈建飞,王潇博,焦贺勋,时洪艳,张鑫,刘建波,石达,冯力. 2016
[2]猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 肖帅,刘新生,方玉珍,周鹏,张巧玲,芦延珍,董昭良,张永光,王永录,魏彦明. 2017
[3]猪德尔塔冠状病毒重组聚合酶扩增检测方法的建立与应用. 肖帅,刘新生,方玉珍,周鹏,张永光,王永录,魏彦明. 2019
[4]国内首株猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus)的分离鉴定. 陈建飞,王潇博,焦贺勋,时洪艳,张鑫,刘建波,石达,冯力. 2016
[5]猪德尔塔冠状病毒S蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 范前进,刘秋歌,石达,王潇博,张家林,汤荣锋,陈建飞,冯力. 2021
[6]猪德尔塔冠状病毒BJ株的分离鉴定与致病性分析. 刘秋歌,王洪峰,范前进,冯力,陈建飞. 2020
[7]基于转录组测序技术分析猪德尔塔冠状病毒诱导IPEC-J2细胞中自噬相关的变化. 江珊,李秀丽,李富强,李程,陈建飞,张莉,任卫科,朱琪,冯力,鄢明华. 2023
[8]STAG2基因敲除的IPEC-J2细胞系构建及其对PDCoV复制影响的研究. 张洪玲,陈建飞,石照蓉,李明蔚,吴洋,郭龙军,冯力. 2022
[9]猪德尔塔冠状病毒昆明小鼠感染模型的建立. 宋俊菡,王元红,邓小莺,王俊娜,虞凌雪,王斌,周艳君,童光志,李国新. 2023
[10]猪德尔塔冠状病毒M蛋白参与病毒诱导IL-8产生的研究. 石照蓉,陈建飞,张洪玲,时洪艳,郭龙军,冯力. 2022
[11]猪德尔塔冠状病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体制备. 叶晨倩,李智丽,叶曼青,秦文珍,杨心雨,翟雪滢,郑浩,童武,李国新,于海,童光志,单同领,娄华,孔宁. 2022
[12]基于酵母转化重组的猪德尔塔冠状病毒反向遗传系统的构建. 孙琳舒,程群,刘甜,杨心雨,秦文珍,孔宁,单同领,李有文. 2025
[13]PDCoV N基因TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立. 马翮斯,罗灵芝,王元红,虞凌雪,李国新. 2025
[14]猪瘟重组蛋白E2的兔体免疫保护试验. 田宏,吴锦艳,尹双辉,尚佑军,郑海学,刘湘涛. 2009
[15]H5亚型禽流感病毒HA基因昆虫／杆状病毒系统的表达及对BALB/c小鼠的免疫保护. 孟庆文,刘光亮,于康震,童光志,刘娣,施建忠,陈化兰. 2006
[16]猪水疱病重组蛋白P1的豚鼠免疫试验. 田宏,吴锦艳,尚佑军,郑海学,孙世琪,刘湘涛,谢庆阁. 2008
[17]我国兽用基因工程疫苗研发现状与策略. 智海东,王云峰,陈洪岩. 2011
[18]猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性试验. 刘丹,王一平,吴洪丽,危艳武,刘建波. 2013
[19]口蹄疫病毒重组蛋白表达及其亚单位疫苗研究进展. 王光华,独军政,薛慧文,常惠芸. 2007
[20]牛流行热病毒亚单位疫苗的研究Ⅰ亚单位疫苗对牛的安全性和免疫试验. 白文彬,严隽端,张自刚,姜春凌,王春,田枫岚,林秀英. 1988
作者其他论文 更多>>
-
稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系构建及鉴定
作者：王彩荷;梁玉斌;孙普;赵志荀;王润泽;李平花;卢曾军;杜晓华;刘霞;马雪青
关键词：II型黏病毒抗性蛋白(Mx2);慢病毒包装;PK-15细胞系;伪狂犬病病毒(PRV)
-
242个鲜食葡萄品种果实香气组分数据集
作者：冀晓昊;武亚敬;于祎飞;王孝娣;刘凤之;李明亮;王贺;刘霞;刘俊;王海波
关键词：葡萄;香气;气质联用;遗传多样性
-
一种基于截短N蛋白的猪丁型冠状病毒抗体ELISA检测方法的建立
作者：王东升;于瑞明;张莉萍;白英杰;刘霞;王永录;杜晓华;刘新生
关键词：猪δ冠状病毒;截短N蛋白;IgG抗体;间接ELISA
-
薯类作物主要病虫害综合防治理论与实践
作者：高玉林;徐进;闫俊杰;董莎萌;李素华;周文武;孙厚俊;杨志辉;邱思鑫;刘霞;周倩;赵志坚
关键词：马铃薯;甘薯;病虫害;综合防治
-
基于复配的蓝靛果冻干风味协同调控
作者：张雅欣;胡佳星;李旋;刘霞;毕金峰
关键词：浆果;复配;挥发性风味;真空冷冻干燥;感官评价
-
基于塞内卡病毒A猪源中和性Fab抗体的竞争ELISA检测方法的建立与评价
作者：梁玉斌;马雪青;何宜轩;王彩荷;李坤;李平花;付元芳;卢曾军;杜晓华;刘霞;孙普
关键词：塞内卡病毒A;竞争ELISA;中和抗体;诊断检测
-
猪德尔塔冠状病毒N蛋白单克隆抗体制备及双抗体夹心ELISA方法建立
作者：王田田;于瑞明;张莉萍;白英杰;张中旺;潘丽;张全伟;刘新生
关键词：猪德尔塔冠状病毒(PDCoV);N蛋白;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA