一株抗猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 张泉;张元峰;黄丽;王胜男;蔡雪辉;熊涛;翁长江
作者机构:
关键词: 猪脑心肌炎病毒;VP2蛋白;单克隆抗体;抗原表位
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2015 年 07 期
页码: 553-556
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为制备抗猪脑心肌炎病毒(EMCV)HB10株VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白(r VP2),纯化后将其免疫BALB/c小鼠,取免疫的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出一株稳定分泌抗VP2 MAb(1D3)。通过间接免疫荧光试验和western blot对该MAb的免疫活性和特异性进行鉴定,结果表明1D3 MAb仅能够特异性与EMCV全病毒反应。此外,通过构建截短的VP2蛋白重组质粒,采用western blot的方法对VP2蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb 1D3识别的线性表位区域为89DGGVFGAALRRH100。本实验结果为进一步研究VP2蛋白的功能及建立EMCV检测方法奠定了基础。
分类号: S852.65`S852.4
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