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HMCES蛋白促进猪流行性腹泻病毒在Vero细胞中的复制

文献类型： 中文期刊

作者： 温永强;于瑞明;张莉萍;张中旺;王永录;潘丽;刘霞;刘新生

作者机构：

关键词： HMCES;猪流行性腹泻病毒;病毒复制;Vero细胞

期刊名称：微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版）

摘要： 【目的】鉴定能够调控猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）复制的关键宿主蛋白。【方法】我们利用LC-MS/MS技术结合串联质谱标签（Tandem mass tag，TMT），分析PEDV感染Vero细胞36 h后和未感染组的蛋白组学差异。鉴定筛选114个显著差异表达蛋白，其中宿主胚胎干细胞特异性5-羟甲基胞嘧啶结合蛋白（5-hydroxymethylcytosine binding， ES cell-specific protein，HMCES）显著上调。进一步构建HMCES真核表达质粒，通过蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测过表达HMCES对PEDV复制的影响；合成针对HMCES基因的特异性siRNA，利用Western blot和RT-qPCR检测siRNA对HMCES表达的干扰效果及HMCES被干扰后对PEDV复制的影响。【结果】我们的试验结果表明，过表达HMCES能显著促进PEDV在Vero细胞中复制，并且复制水平随着HMCES的剂量递增呈现剂量依赖式增加；siRNA-341下调内源性HMCES表达进而抑制PEDV复制。【结论】HMCES促进PEDV复制，本研究为进一步探究HMCES在抗PEDV免疫应答中的作用及机制提供了参考依据。

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