响应面法优化灵芝胞外漆酶酶活测定反应体系
文献类型: 中文期刊
作者: 王胜;于廷连;张雪超;李金涛;闫梅霞
作者机构:
关键词: 灵芝漆酶;ABTS;反应条件;响应面优化
期刊名称:特产研究
ISSN: 1001-4721
年卷期: 2023 年
页码:
收录情况: 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为探索一种最佳的灵芝胞外漆酶酶活力测定反应体系,从而确定更为准确测定酶活力的方法。本研究以灵芝漆酶为研究对象,以2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为底物,采用分光光度法确定最佳酶促反应时间以及最大吸收波长,使用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,选取酶活力测定反应体系中的缓冲液浓度、pH以及反应温度作为影响因素进行单因素优化,以所测定灵芝漆酶酶活力为响应值进行响应面优化与评估。结果表明,酶促反应中最佳酶活力测定时间为起始3 min,最大吸收波长为420 nm。柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中,灵芝漆酶的最佳测定条件为缓冲液浓度0.19 mol/L、反应温度29.7℃、pH 3.45,灵芝漆酶活性为52.56 U/mL。本研究基于响应面法灵芝漆酶反应条件进行优化,提高检测的准确度,为后续灵芝漆酶的相关研究提供参考,以及为灵芝漆酶的进一步开发与应用奠定基础。
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