文献类型： 中文期刊
作者： 翟文竹;黄颖;陶春豪;何宇恒;储媛媛;王振;庞忠宝;朱鸿飞;贾红
作者机构：
关键词： 非洲猪瘟病毒(ASFV);真核表达;pp62蛋白;免疫应答
期刊名称：中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2024 年 12 期
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）
摘要： 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的高度接触性传染病.为确定ASFV pp62(CP530R)蛋白的免疫原性,本研究利用真核表达重组质粒pMAL-Fc-CP530R转染HEK 293F细胞表达pp62重组蛋白,通过皮下注射免疫C57BL/6J小鼠,10 μg/只,分别于0、21 d等剂量(加强)免疫1次,通过ELISA、IFN-γ ELISpot及流式细胞术等方法评价pp62重组蛋白在C57BL/6J小鼠体内的体液免疫及细胞免疫效果.SDS-PAGE结果显示,HEK 293F细胞表达重组蛋白大小约为118.5 kDa,与pp62蛋白预期大小一致;Western blot结果显示利用ASFV标准阳性血清可检测到特异性条带;ELISA结果表明,pp62重组蛋白一免后7 d即可刺激机体产生特异性抗体,二免后7 d抗体效价可达1∶1 638 400;IFN-γ ELISpot结果显示,pp62重组蛋白免疫C57BL/6J小鼠可产生IFN-γ,与PBS空白组相比差异显著(P＜0.05);流式细胞术检测结果显示,免疫小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+T细胞亚类比值显著高于PBS空白组(P＜0.05);Q-PlexTM Mouse多因子检测结果显示,二免后免疫小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10分泌水平显著上调(P＜0.001).结果表明,pp62重组蛋白免疫可以激活机体产生较好的体液免疫与细胞免疫,从而为ASFV pp62蛋白功能研究及ASF新型疫苗抗原筛选提供参考.
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