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PE＿PGRS37蛋白通过抑制巨噬细胞自噬流促进结核分枝杆菌的胞内定殖

文献类型： 中文期刊

作者： 李梦雨;张镇钧;冯婷婷;王慧;聂蝉蝉;陈春文;高云洁;段祎凡;郭若男;崔莹莹;党光辉;刘思国

作者机构：

关键词： 结核分枝杆菌;自噬;PE/PPE家族蛋白;PE＿PGRS37蛋白

期刊名称：中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 目的 研究结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis, Mtb） PE/PPE家族蛋白PE＿PGRS37对耻垢分枝杆菌（Mycobacteriumsmegmatis, Ms）生长及巨噬细胞自噬的影响，探讨其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法 通过PCR从Mtb基因组中扩增pe＿pgrs37基因，利用同源重组法构建重组载体pAIN-PE＿PGRS37。电击法将pAIN-PE＿PGRS37和pAIN分别整合入Ms中，构建重组菌pAIN-PE＿PGRS37/Ms和pAIN/Ms，应用Western blot方法鉴定PE＿PGRS37蛋白在Ms中的表达情况。将重组菌接种于7H9/7H10培养基中观察其菌落形态及生长曲线。利用pAIN-PE＿PGRS37/Ms及pAIN/Ms感染U937细胞，通过Western blot和免疫荧光检测巨噬细胞自噬流水平，菌落计数法检测重组菌的胞内存活情况。结果 成功构建重组载体pAINPE＿PGRS37。Western blot鉴定结果显示，pAIN-PE＿PGRS37/Ms中正确表达PE＿PGRS37蛋白。与pAIN/Ms相比，pAINPE＿PGRS37/Ms的菌落形态无明显差异，生长速度在10～16 h显著增加，26 h时共同到达平台期。与pAIN/Ms感染组相比，pAIN-PE＿PGRS37/Ms感染U937细胞24 h后，巨噬细胞LC3-II和p62蛋白的表达量显著上调（P<0.001），并抑制自噬体和溶酶体融合。与pAIN/Ms相比，pAIN-PE＿PGRS37/Ms可以在12 h,24 h和48 h时显著增加其在巨噬细胞中的存活（P<0.05）。结论PE＿PGRS37蛋白通过阻断巨噬细胞自噬流从而抑制巨噬细胞自噬，促进分枝杆菌在巨噬细胞中存活。

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