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环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因高免疫原性区片段的克隆及其表达

文献类型： 中文期刊

作者： 党志胜;罗建勋;蒋锡仕;黄孝玢;白启;殷宏

作者机构：

关键词： 环形泰勒虫;表面蛋白基因;高免疫原性区;克隆;表达

期刊名称：中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2004 年 34 卷 01 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据环形泰勒虫TaA12 72 1株裂殖体表面抗原 (TaSP)基因的序列设计了 1对引物 ,用PCR扩增出该基因长为 393bp的高免疫原性区片段 (SBxp)。将扩增产物连接到 pGEM TEasy载体上 ,转化入大肠埃希氏菌JM 10 9中进行克隆。随后将重组质粒 pGEM SBxp和表达载体 pGEX 4T 1分别以BamHⅠ、XhoⅠ酶切后 ,将酶切的目的片段SBxp亚克隆到原核表达载体中构建了重组表达载体 pGEX 4T 1 SBxp ,并将其转化到BL2 1宿主菌中。提取重组质粒经BamHⅠ、XhoⅠ酶切、PCR鉴定和测序确证后 ,阳性克隆用IPTG诱导表达。收集不同时间的菌液进行SDS PAGE电泳和Westernblotting检测。结果 ,SBxp基因在大肠埃希氏菌中成功表达 ,其表达产物为分子质量 4 3ku的融合蛋白 ,该产物能被牛环形泰勒虫阳性血清所识别。

分类号： S852.7

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