数字农科院2.0

4种牛分枝杆菌特异性基因PCR检测方法的比较与评价

文献类型： 中文期刊

作者： 辛凌翔;王豪杰;刘燕;姚文生;胡云皓;张一帜;赵浩然;鑫婷;朱良全

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;病原;PCR;灵敏度;特异性

期刊名称：畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2023 年 55 卷 12 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 牛分枝杆菌是严重危害养牛业的重要人兽共患病原微生物，PCR是检测该病原的有效手段之一。本研究通过筛选最佳的PCR检测方法，以期为临床监测牛分枝杆菌感染提供技术参考。针对牛分枝杆菌4种常见的特异性基因(16S rRNA、IS6110、IS1081和Mpb64)分别设计引物，通过温度梯度PCR法确定最适退火温度；采用牛分枝杆菌参考株核酸确定PCR最小检测限，同时运用牛分枝杆菌国内参考株、牛分枝杆菌国际参考株、禽分枝杆菌、胞内分枝杆菌、副结核分枝杆菌、羊种布鲁菌以及牛种布鲁菌进行特异性比较试验；最后运用人工模拟牛分枝杆菌感染组织样本(肺脏、淋巴结、奶样)比较不同PCR方法检测效果。4对引物以60℃为退火温度时均能检测分枝杆菌，其中IS6110、IS1081和Mpb64基因引物可以特异性检测牛分枝杆菌。IS6110和IS1081基因引物对牛分枝杆菌基因组的检测灵敏度最高，可达10-10 ng/μL;IS6110基因引物在肺脏和淋巴结中牛分枝杆菌检测灵敏度可达106 CFU/mL以上，而Mpb64基因引物对奶样中牛分枝杆菌的检测灵敏度可达102 CFU/mL。本研究筛选出相对适宜的牛分枝杆菌PCR检测方法，为牛结核病病原学检测和临床应用提供技术支持。

分类号：

  • 相关文献

[1]马铃薯土传病原菌快速检测方法的比较分析及其应用. 李磊,赵昱榕,谢学文,石延霞,柴阿丽,李宝聚. 2020

[2]不同牛分枝杆菌特异性基因PCR方法的比较. 张春燕,秦玉明,边增杰,徐中清,牛凯,许冠龙,丁家波,鑫婷,朱良全. 2020

[3]植物罹病组织中象耳豆根结线虫的LAMP快速检测方法. 彭焕,丁中,贺文婷,黄文坤,彭德良. 2013

[4]基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用. 蒙琦,常亮,杨明,曹映辉,贺泂杰. 2025

[5]牛分枝杆菌特异性PCR检测方法的建立及初步应用. 刘思国,王春来,宫强,王牟平,彭永刚,张秀华,郭洋,郭设平,邵美丽. 2006

[6]玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及鉴定. 唐晓倩,李培武,张奇,张文,丁小霞,王海彬. 2012

[7]番茄斑萎病毒4种检测方法比较. 赵巍巍,杨家强,周小毛,吴青君. 2015

[8]排空强饲法测定鸡饲粮表观代谢能值的灵敏度与置信限. 王美琴,赵峰,贾刚,刘成玲,王钰明,张宏福. 2013

[9]麦长管蚜ELISA检测体系的建立. 高书晶,庞保平,陈正贤. 2008

[10]PAS-ELISA检测GFLV和GLRaV-3技术的研究. 陈建军,曹香林,李学梅,刘崇怀,古勤生. 2007

[11]PAS-ELISA检测GFLV和GLRaV-3技术的研究. 陈建军,曹香林,杨清香,李学梅,刘崇怀,古勤生. 2006

[12]多聚酶对转基因产品PCR检测的影响分析. 夏玉平,吴刚,武玉花,张丽,卢长明. 2010

[13]基于SYBR Green Ⅰ的桑树皱叶病毒qPCR检测方法的建立及应用. 孙鑫,张健,杨磊,卢全有. 2020

[14]抗单端孢霉烯族T-2毒素单克隆抗体的制备及鉴定. 张宁,李培武,张奇,张文,李敏,李鑫,李冉. 2014

[15]食用油中邻苯二甲酸二丁酯高灵敏检测技术建立与应用. 向成艳,刘品品,唐晓倩,张奇,李培武. 2024

[16]牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响. 刘淑清,李平俊,鑫婷,侯绍华,朱鸿飞,贾红. 2015

[17]牛分枝杆菌TB9.8蛋白的表达及其诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞因子的分泌. 刘淑清,贾红,侯绍华,鑫婷,袁维峰,郭晓宇,张改梅,高新桃,李明. 2014

[18]牛分枝杆菌DNA疫苗免疫效果的研究. 宫强,刘思国,郭设平,王春来,王勇,刘建东,迟磊,赵昆,孔宪刚. 2006

[19]牛分枝杆菌三价组合及融合DNA疫苗免疫效果的研究. 宫强,刘思国,王春来,王勇,刘建东,刘慧芳,施远祥,阿曼古丽,李发斌,孔宪刚. 2008

[20]牛分枝杆菌Mb1230基因的表达纯化及其活性评价. 李明,贾红,鑫婷,郭晓宇,袁维锋,侯邵华,侯强,高新桃,吴竞. 2015

作者其他论文 更多>>