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非洲猪瘟病毒多基因家族MGF360-13L基因功能的初步研究

文献类型： 中文期刊

作者： 陈达年;马旭升;代军飞;汪洋;李茜;白衡;毛甜甜;刘永生;丁龙;陈昊翰;陈思言;饶宇飞;贾宁;张杰;郑海学;刘湘涛

作者机构：

关键词： ASFV;MGF360-13L;炎性因子;生长曲线测定

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 旨在初步探究非洲猪瘟病毒（African swine fever virus， ASFV）多基因家族MGF360-13L基因的功能。使用生物信息学软件对MGF360-13L基因进行分析；构建真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L并转染至293T细胞进行表达；利用同源重组方法构建基因缺失毒株ASFV-△MGF360-13L，以相同的感染复数（MOI=0.01）在猪肺泡巨噬细胞（PAMs）中感染基因缺失毒株和亲本毒株（ASFV CN/GS/2018）后，利用红细胞吸附试验（HAD）计算病毒滴度、并绘制体外生长曲线；以MOI=1将ASFV-△MGF360-13L和ASFV CN/GS/2018分别感染猪骨髓巨噬细胞（BMDM），利用qPCR和ELISA测定细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果表明，MGF360-13L基因在ASFV基因Ⅱ型中相对保守，编码蛋白属于非分泌型、无跨膜区、亲水性好；构建的真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L被293T细胞表达；成功获得MGF360-13L单基因缺失毒株ASFV-△MGF360-13L，与ASFV CN/GS/2018相比，其体外复制没有显著性差异；在ASFV-△MGF360-13L感染BMDM后，IL-1β、IL-6和TNF-α炎性细胞因子在转录和分泌水平都显著高于ASFV CN/GS/2018。本研究成功制备了ASFV的MGF360-13L基因缺失毒株，并证实了MGF360-13L基因作为ASFV复制非必需基因具有抑制炎性因子表达的功能，这为进一步注释ASFV MGF360-13L基因功能提供了线索。

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