数字农科院2.0

牛支原体P48蛋白的表达及间接血凝检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 简莹娜;储岳峰;赵萍;陈胜利;贺英;秦明明;潘玮玮;刘永生;逯忠新

作者机构：

关键词： 牛支原体;重组P48蛋白;可溶性表达;间接血凝试验;抗体检测

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2015 年 03 期

页码： 241-246

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 优化并合成牛支原体的p48基因,将其克隆到pET-32a(+)表达载体上后,转化大肠杆菌BL21(DE3),16℃低温诱导表达,获得可溶性表达的大小约66ku的重组P48蛋白。将纯化后的重组P48蛋白致敏戊二醛和鞣酸处理过的绵羊红细胞,建立了检测牛支原体抗体的间接血凝试验。重组P48蛋白致敏红细胞的最佳质量浓度是20~40μg/mL,牛支原体超免疫血清抗体效价达1∶2 048~1∶4 096。该方法对牛肺疫、牛巴氏杆菌病、牛病毒性腹泻病、布氏杆菌病、结核病、口蹄疫、牛生殖道支原体感染、里奇氏支原体感染、大肠杆菌病阳性血清的检测结果均为阴性。该方法的特异性为100%,敏感性为93.33%。与国外商品化的牛支原体ELISA试剂盒相比,平均符合率为96.15%。对833份田间血清和1 084份乳清进行检测,阳性率分别是15.37%和19.56%。结果表明,该方法敏感性高、特异性强和重复性好,可用于牛支原体抗体水平检测、牛支原体病的辅助诊断和流行病学调查。

分类号： S852.62

  • 相关文献

[1]丝状支原体山羊亚种抗体间接血凝检测方法的建立及应用. 储岳峰,逯忠新,赵萍,高鹏程,贺英,石琴. 2007

[2]甘南碌曲县绵羊弓形虫病调查. 李春鲜,王茂林,杜重波,梁文祥,张惠岚,徐生正,祁国军. 1992

[3]可溶性E2蛋白作为抗原的检测猪瘟病毒血清抗体间接ELISA方法的建立. 尹双辉,尚佑军,刘艳红,蔺芳,才学鹏,刘湘涛. 2009

[4]PCV2衣壳蛋白肽段的表达及其血清抗体间接ELISA检测方法. 杨顺利,尹双辉,尚佑军,沈小燕,刘湘涛. 2011

[5]宁夏部分地区猪传染性胸膜肺炎的血清学调查. 白刚,贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程,张念章,逯忠新. 2010

[6]石河子地区人畜弓形虫感染的血清学调查. 王为升,张金生,陈伟,王俊伟,孟庆玲,乔军,WANG Wei-sheng,ZHANG Jin-sheng,CHEN Wei,WANG Jun-wei,MENG Qing-ling,QIAO Jun. 2011

[7]宁夏部分地区副猪嗜血杆菌病的血清学调查. 白刚,贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程,张念章,冯小明,郭晗,樊祜卿,吴润,逯忠新. 2010

[8]猪瘟正向间接血凝试验的改进与应用. 李卫,李树春. 2007

[9]新科学技术讲座第五讲动物寄生虫病的免疫诊断与分子生物学诊断(二). 沈杰. 2004

[10]我国家畜血吸虫病防治研究的回顾与展望. 林矫矫,沈纬,蔡幼民,冯新港,刘金明,傅志强,陶丽红. 2006

[11]第四讲动物寄生虫病的免疫诊断和分子生物学诊断(一). 沈杰. 2003

[12]绵羊肺炎支原体间接血凝诊断方法的建立. 赵萍,逯忠新,储岳峰,高鹏程,贺英,石琴. 2008

[13]我国一些地区羊衣原体血清流行病学调查分析. 成伟伟,彭靖雯,张克山,刘永杰,孔汉金,尚佑军,刘湘涛,刘磊. 2015

[14]绵羊棘球蚴囊液抗原在IHA中的特异性研究. 刘金凤,贾万忠,刘卫,张克益,田广孚. 1991

[15]猪源支气管败血波氏杆菌间接血凝诊断方法的建立. 贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程,赵海燕,逯忠新. 2008

[16]上海市宠物门诊犬弓形虫病流行病学调查. 龚国华,周锦萍,孙泉云,刘佩红,王权. 2009

[17]猪瘟间接血凝试验的研究. 李树春,何建新,李德珍,韩福祥,王威,李宏. 1993

[18]用间接血凝试验检测猪传染性胸膜肺炎. 逯忠新,鲁炳义,赵萍. 1999

[19]动物牛皮蝇蛆病诊断方法的进展(综述). 高兴春,徐梅倩,何国声. 2006

[20]兰州地区人群弓形虫病血清学调查. 张德林,窦永喜,李学瑞,赵海燕,杨敏. 2003

作者其他论文 更多>>