数字农科院2.0

吕氏泰勒虫cDNA表达文库的构建及其抗原基因的免疫筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 李有全;罗建勋;高金亮;关贵全;马米玲;刘志杰;刘军龙;刘爱红;任巧云;党志胜;鲁炳义;刘光远;白启;殷宏

作者机构：

关键词： 吕氏泰勒虫;cDNA表达文库;构建;免疫筛选

期刊名称：中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2009 年 42 卷 01 期

页码： 331-339

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表达文库,并从中筛选抗原候选基因。【方法】从吕氏泰勒虫裂殖子直接提取和纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对连接产物进行体外包装以形成完整的噬菌体,并用之转染大肠杆菌ER1647,从而构建成吕氏泰勒虫的cDNA表达文库。用吕氏泰勒虫阳性血清和兔抗绵羊IgG-AP筛选得到阳性克隆,经测序和Blast软件分析并获得新基因。【结果】成功构建吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表达文库,其初级库容量约为1.0×106PFU,扩增文库的滴度为8.2×108PFU·ml-1,文库重组率为100%;通过免疫学筛选、测序和Blast软件分析,共获得30个新基因,其中15个基因已登录GenBank/NCBI。【结论】为研究泰勒虫疫苗、新型医药和诊断抗原,以及发展可持续性防制羊泰勒虫病提供基本材料。

分类号： S852.7

  • 相关文献

[1]莫氏巴贝斯虫裂殖子cDNA表达文库的构建及免疫学筛选. 王锦明,刘军龙,刘爱红,马米玲,牛庆丽,任巧云,杨吉飞,刘志杰,李有全,罗建勋,殷宏,关贵全. 2012

[2]长角血蜱饥饿雌蜱cDNA表达文库的免疫筛选与初步分析. 张丽艳,刘光远,田战成,谢俊仁,刘建刚. 2009

[3]猪囊尾蚴cDNA表达文库的免疫筛选. 宗瑞谦,景志忠,才学鹏. 2004

[4]长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的免疫筛选与初步分析. 刘光远,谢俊仁,田占成,李知新,龚真莉,王路,柴慧萍,才学鹏. 2008

[5]柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建. 林青,才学鹏,窦永喜,翟军军,闫鸿斌,张彦明,田广孚,景志忠. 2007

[6]长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的构建. 谢俊仁,刘光远,田占成,李知新,贾宁. 2007

[7]青海血蜱cDNA表达文库的构建. 高金亮,关贵全,马米玲,刘志杰,党志胜,刘爱红,李文卉,任巧云,罗建勋,殷宏. 2005

[8]柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆与鉴定. 林青,才学鹏,窦永喜,翟军军,闫鸿斌,张彦明,田广孚,景志忠. 2006

[9]长角血蜱卵cDNA表达文库的构建. 刘光远,田占成,才学鹏,李知新,谢俊仁,王路,张林,龚真莉. 2008

[10]猪囊尾蚴cDNA质粒表达文库的构建. 宗瑞谦,才学鹏,季建莉,景志忠. 2004

[11]猪带绦虫六钩蚴TsO1基因的克隆、表达与结构预测. 才学鹏,景志忠,窦永喜,蒙学莲,吴国华,骆学农,郑亚东. 2004

[12]猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建及免疫原基因的筛选与克隆. 景志忠,郭爱疆,海岗,宗瑞谦,才学鹏. 2005

[13]猪带绦虫六钩蚴免疫原基因的克隆、表达与结构预测. 景志忠,窦永喜,蒙学莲,吴国华,才学鹏. 2005

[14]日本血吸虫保护性单抗SSj14噬菌体模拟抗原表位研究. 王欣之,傅志强,刘金明,黄劭鹏,石耀军,林矫矫,蔡幼民. 2004

[15]蒿甲醚预防日本血吸虫病诱导的兔特异抗体相关靶抗原编码基因的筛选. 朱传刚,林矫矫,陈建秀. 2004

[16]吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫内转录间隔区基因序列的测定与系统进化分析. 牛庆丽,邱家祥,关贵全,马米玲,刘志杰,党志胜,刘爱红,高金亮,任巧云,李有全,刘军龙,白启,罗建勋,殷宏. 2008

[17]与吕氏泰勒虫TlSP蛋白互作的绵羊淋巴细胞蛋白酵母双杂交系统的筛选. 秦鸽鸽,韩元,李有全,殷宏,罗建勋,蔡葵蒸. 2016

[18]吕氏泰勒虫TlSP基因的克隆和原核表达. 何海宁,李有全,刘志杰,杨吉飞,陈泽,罗建勋,殷宏. 2012

[19]羊外周淋巴细胞酵母双杂交文库构建. 秦鸽鸽,关贵全,刘军龙,刘爱红,谢俊仁,牛庆丽,陈泽,殷宏,罗建勋,李有全. 2015

[20]吕氏泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆与序列分析. 刘爱红,关贵全,刘军龙,李有全,马米玲,牛庆丽,任巧云,殷宏,罗建勋. 2010

作者其他论文 更多>>