文献类型： 中文期刊
作者： 朱建勋;赵萍;郝华芳;陈胜利;翟肖辉;刘永生;储岳峰
作者机构：
关键词： 山羊支原体山羊肺炎亚种;TaqMan探针;实时荧光定量PCR;特异性;敏感性
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2018 年 4 期
页码： 403-411
摘要： 为了快速诊断和定量检测山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolumsubsp.capripneumoniae,Mccp),选择Mccp arc D基因为靶序列,设计特异性引物和探针,建立并优化反应体系,以Mccp和其他支原体及细菌等16种病原体基因组DNA为模板,进行普通PCR和TaqMan探针实时荧光定量PCR特异性检测,并对该方法的敏感性和重复性进行评估。同时利用该方法对68份山羊临床样本进行检测。结果显示,仅Mccp有扩增条带(185 bp)和明显的荧光扩增信号(Ct值为21.93),其余供试菌株没有扩增条带,且表现出微弱的荧光扩增信号(Ct值均大于31)。普通PCR检测的灵敏度为5.96×104copies/L,而TaqMan探针实时荧光定量PCR检测的灵敏度为5.96 copies/L。Ct值在组内和组间重复的变异系数均小于1%。对68份山羊临床样本进行TaqMan探针实时荧光定量PCR检测,结果有2份为Mccp阳性样本,阳性率为2.94%。本研究建立了一种特异、敏感、稳定可靠的Mccp TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,可用于Mccp的快速诊断和定量检测,为山羊传染性胸膜肺炎的防控提供了有效的技术手段。
分类号： S852.62
- 相关文献
[1]牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 翟肖辉,王方国,郝华芳,颜新敏,陈胜利,Hussam Askar Mohamad,朱建勋,储岳峰. 2019
[2]不同牛分枝杆菌特异性基因PCR方法的比较. 张春燕,秦玉明,边增杰,徐中清,牛凯,许冠龙,丁家波,鑫婷,朱良全. 2020
[3]反转录环介导等温扩增技术快速检测猪水疱病毒方法的建立. 丁小龙,程芳珍,李茜,李国秀. 2019
[4]牛巴贝斯虫病ELISA诊断方法的建立. 李安岩,刘爱红,王锦明,朱海,马米玲,任巧云,关贵全,罗建勋. 2014
[5]口蹄疫O型固相竞争ELISA抗体检测试剂盒的临床应用. 柴静,林密,周广青,冯霞,马军武. 2011
[6]补体结合试验诊断边虫感染牛的研究. 张其才,吕文顺,窦惠芳,吕文祥,殷宏,余丰. 1993
[7]羊巴贝斯虫TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立. 刘爱红,关贵全,刘军龙,谢俊仁,李有全,殷宏,罗建勋. 2015
[8]基于猪圆环病毒2型病毒样颗粒的间接ELISA抗体检测方法的建立. 敬晓棋,王运航,张韵,白满元. 2022
[9]细粒棘球绦虫抗原B的研究进展. 袁维峰,巫剑,贾红,侯绍华,郭晓宇,马世春,朱鸿飞. 2013
[10]羊痘病毒多重PCR检测方法的建立. 韩若婵,张强,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,朱彩珠,谢芳,鞠厚斌,施程洪,才学鹏. 2008
[11]Rea1-timeqPCR检测安氏隐孢子虫卵囊方法的建立及应用. 李安平,王权,黄克和,朱志宏,王赞江,袁耀明,曾晓华. 2009
[12]中东呼吸综合征冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立. 迟航,郑学星,盖微微,王翀,王化磊. 2014
[13]尼帕病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法建立. 孙彤,孙竹筠,刘静宜,王培培,苏苌,陈鸿军. 2022
[14]两种新型快速检测猪SP-A基因方法的建立及对比. 马妍妍,彭永刚,宋铭忻,崔尚金. 2014
[15]裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立. 朱晓文,李林,桑晓宇,高玉伟,胡桂学,冯娜,王铁成,步志高,夏咸柱. 2012
[16]Rea1-time qPCR检测安氏隐孢子虫卵囊方法的建立及应用. 李安平,王权,黄克和,朱志宏,王赞江,袁耀明,曾晓华. 2009
[17]猪巨细胞病毒（PCMV）TaqMan 荧光定量PCR检测方法. 张岳,孙彤,郭洁真,魏晓锋,熊炜,刘静宜,陈鸿军,陈丹清. 2023
[18]山羊支原体山羊肺炎亚种M17基因的原核表达及细胞定位研究. 赵国强,郝华芳,陈胜利,颜新敏,马丽娜,邹璐,史耀旭,刘永生,曾巧英,储岳峰. 2020
[19]山羊支原体山羊肺炎亚种培养基的筛选及生长曲线测定. 高珊,逯忠新,许立华. 2012
[20]一株山羊支原体山羊肺炎亚种的分离鉴定与分子特征. 辛九庆,李媛,张建华,胡守萍,王亮. 2007
作者其他论文 更多>>
-
不同免疫刺激剂的安全性及免疫增强特性评价
作者：周梦婷;宋银娟;李娜;冯雅茹;冉多良;李斌;储岳峰
关键词：免疫刺激剂;安全性;免疫增强特性
-
结核分枝杆菌免疫逃逸机制研究进展
作者：李娜;宋银娟;储岳峰
关键词：结核分枝杆菌;巨噬细胞;免疫逃逸;宿主导向疗法
-
绵羊肺炎支原体特异性诊断靶标筛选及其间接ELISA方法的建立
作者：李倩倩;高鹏程;葛家振;吴晓妮;田彤彤;许健;郝华芳;郑福英;蔺国珍;储岳峰
关键词：绵羊肺炎支原体;Mo pdhD;免疫原性;间接ELISA
-
选择性自噬在病原体感染中的作用研究进展
作者：唐丽;宋银娟;许健;储岳峰
关键词：选择性自噬;线粒体自噬;内质网自噬;异源自噬;感染
-
绵羊肺炎支原体荚膜多糖的提取、纯化及反应原性分析
作者：田彤彤;葛家振;李倩倩;高鹏程;吴晓妮;宋国栋;刘一健;郑福英;储岳峰
关键词：绵羊肺炎支原体;荚膜多糖;三螺旋结构;反应原性
-
基于可见光测定的山羊支原体山羊肺炎亚种抗原定量
作者：葛家振;高鹏程;田彤彤;吴晓妮;李倩倩;田可昕;宋国栋;郑福英;储岳峰
关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种;改良培养基;荚膜多糖;紫外图谱;CTAB沉淀法
-
绵羊肺炎支原体EF-Tu蛋白原核表达及ELISA方法建立
作者：陈思宇;张梦洁;田睿;陈益;刘镝钺;李文良;毛立;程子龙;杨蕾蕾;孙敏;张纹纹;杜改梅;储岳峰;王金泉;刘茂军
关键词：绵羊肺炎支原体;EF-Tu蛋白;原核表达;间接ELISA