利用信息肽诱导和Cre/LoxP系统构建猪链球菌基因缺失株
文献类型: 中文期刊
作者: 刘冉;陈福广;陈平;黄萌萌;朱金鲁;谢芳;孟庆文;刘思国;刘建华;张跃灵
作者机构:
关键词: 猪链球菌;信息肽诱导;Cre/LoxP系统;基因缺失
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2019 年 2 期
页码: 125-130
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 为建立一种高效的猪链球菌(Streptococcus suis)基因缺失方法,本研究利用信息肽诱导DNA片段转化和Cre/LoxP系统去除抗性基因这两种技术,通过在S.suis 05ZYH33的ssu051921基因上、下游片段和壮观霉素抗性基因(spc)片段之间引入LoxP位点,采用信息肽GE9诱导构建的DNA片段转化S.suis并发生重组,经抗性筛选快速获得spc替代ssu051921基因的缺失株;进一步引入pSET6s/PtufA-cre质粒表达Cre重组酶作用于LoxP位点,去除spc基因,产生无痕ssu051921基因缺失株,经测序和RT-PCR验证缺失正确.本研究建立的该方法简单、快捷、阳性率高,为构建S.suis基因缺失株、研究S.suis致病机制提供了新的选择.
分类号: S852.61
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