Marc-145细胞微载体悬浮培养消化放大技术研究
文献类型: 中文期刊
作者: 尹茉莉;张爽;王振军;冯二凯;冷雪;王会岩;李艳;孙美艳
作者机构:
关键词: Marc-145细胞;生物反应器;微载体;胰蛋白酶;放大技术;猪繁殖与呼吸综合征病毒
期刊名称:黑龙江畜牧兽医
ISSN: 1004-7034
年卷期: 2019 年 13 期
页码: 11-15,20
摘要: 为了建立Marc-145细胞微载体培养放大技术,使其用于猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)疫苗的规模化生产,试验在7 L生物反应器内微载体培养Marc-145种子细胞,再用胰蛋白酶消化,然后进行逐级放大培养,并通过细胞最佳消化状态试验、保留胰蛋白酶消化液的影响试验、测试回收微载体试验等方法摸索胰蛋白酶消化放大技术参数.结果表明:Marc-145细胞在初级生物反应器内培养时,微载体使用量为5 g/L,细胞密度达3.18*10~6个/mL,并且在状态饱满时进行消化放大;在14 L生物反应器内培养时,Marc-145细胞均匀分布在微载体上并且代谢旺盛,在细胞密度为2.91*10~6个/mL时进行14 L消化放大;在14 L生物反应器内培养Marc-145细胞时,采用批培养方式,细胞比生长速率最大达0.031/h,在培养96小时时细胞密度达2.37*10~6个/mL.说明试验成功建立了生物反应器微载体培养Marc-145细胞的胰蛋白酶消化放大技术,并实现了逐级放大.
分类号: S852.651
- 相关文献
[1]生物反应器微载体放大培养Marc-145细胞及PRRSV增殖情况. 任飞,冯二凯,尹茉莉,栾杨,程悦宁,张淼,于竞杰,盛程程,程世鹏,陈立志. 2017
[2]生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗. 冯二凯,程悦宁,罗国良,易立,王振军,郭利,陈立志,程世鹏. 2019
[3]稳定表达PRRSV M蛋白的MARC-145ORF6细胞系的构建及其对PRRSV增殖的影响. 荆扬,王玉淼,李洋,常辉,马志倩,李志伟,肖书奇. 2024
[4]介孔材料SBA-15固定化胰蛋白酶的研究. 董颖超,齐涛,秦玉昌,王丽娜,李军国,张懿. 2007
[5]日本野生大豆中的一个Kunitz型胰蛋白酶抑制剂变异的纯化与活性测定(英文). 王克晶,海妻矩彦,高畑義人,山下哲朗,平秀晴. 1998
[6]断奶日龄对仔猪胰腺和肠道中胰蛋白酶活性的影响. 张宏福,李长忠,顾宪红,方路,马永喜,龚利敏,冯广明. 2001
[7]日本野生大豆中的一个Kunitz型胰蛋白酶抑制剂变异的纯化与活性测定. 王克晶,海妻矩彦,高--义人,山下哲朗,平秀晴. 1998
[8]胃蛋白酶、胰蛋白酶提取革胡子鲶下脚料中卵磷脂的酶解条件比较. 刘雪凌,陈旭华,贺梦婷. 2016
[9]绿盲蝽丝氨酸蛋白酶基因AlSP4的克隆及取食不同寄主植物后的表达谱分析. 柏立新,张永军,肖留斌,谭永安,吴国强. 2012
[10]稳定表达猪SAMHD1蛋白的MARC-145细胞系构建与鉴定. 杨莘,姜一峰,虞凌雪,刘欢,周艳君,高飞,黄勤峰,童光志. 2017
[11]PRRSV细胞受体CD163 SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立. 马小元,丁耀忠,王俊,张杰,张永光. 2017
[12]金丝桃素体外抗高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒活性的研究. 蒲秀英,梁剑平,许涛,尚若峰,王学红,华兰英,刘宇,邢妍美. 2008
[13]胰蛋白酶基因介导的棉铃虫抗Bt机制解析. 刘晨曦,吴孔明. 2012
[14]饲养温度对蠋蝽胰蛋白酶活性的影响及消化器官形态初步观察. 朱艳娟,殷焱芳,王震,陈红印,刘晨曦. 2022
[15]固定化多酚氧化酶填充床反应器连续制备茶黄素的研究. 王斌,江和源,张建勇,黄永东,王岩. 2010
[16]串联的人胸腺素α1基因在番茄中的高效表达. 曹慧颖,张锐,郭三堆. 2009
[17]油品固定化细胞脱硫研究进展. 罗明芳,高红帅,李玉光,邢建民,李信,刘会洲. 2009
[18]动物生物反应器建立的主要方法与技术. 刘帅,刘长青,包阿东,陆涛峰,吴宏梅,关伟军,马月辉. 2008
[19]利用植物生物反应器生产口服疫苗的进展. 朱会英,吴存祥,胡宝忠,李文彬,韩天富. 2004
[20]人乳铁蛋白基因在番茄中的优化表达. 曹慧颖,郭三堆. 2005
作者其他论文 更多>>
-
鸽圆环病毒的研究进展及展望
作者:王振军;刘亚乔;唐梦乐;呼延含蓉;刘丽娜;吴顺;赵宗正;刘利芳;罗国良;程悦宁;王春霞
关键词:鸽圆环病毒;研究进展;诊断技术;防控策略
-
检测4型牛疱疹病毒的微滴数字PCR方法的建立与应用
作者:程悦宁;王振军;曹泽昭;王春霞;吴丹妮;周雅茜;李响;闫曼平;关继羽;张竞;张海丽
关键词:牛疱疹病毒4型;微滴数字PCR;定量检测
-
重大外来入侵害虫番茄潜叶蛾抗药性及其机制研究进展
作者:冯科力;李寒;曹梦宇;张静航;薛延韬;罗明磊;李艳;马东方;帕提玛·乌木尔汗;黄聪;张桂芬;张毅波
关键词:番茄潜叶蛾;化学防治;田间防效;抗药性;抗性机制
-
猫杯状病毒CC19-01株的分离鉴定及遗传进化分析
作者:闫曼平;单晓枫;程悦宁;冯二凯;吴顺;罗国良;王振军;王春霞
关键词:猫上呼吸道感染;猫杯状病毒;分离鉴定;同源性比对;遗传进化分析
-
牛疱疹病毒4型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
作者:程悦宁;王振军;曹泽昭;王春霞;吴丹妮;李响;张海丽;闫曼平;张竞;关继羽
关键词:牛疱疹病毒4型;SYBR Green Ⅰ;实时荧光定量PCR;gB蛋白
-
不同地区双齿围沙蚕养殖群体营养成分及抗氧化能力的分析与比较
作者:韩梦瑶;房景辉;张爽;严一粟;吕富;赵栩
关键词:双齿围沙蚕;养殖群体;营养成分;氨基酸;脂肪酸;抗氧化酶
-
猫疱疹病毒Ⅰ型诊断技术研究进展
作者:周雅茜;吴丹妮;唐梦乐;吴顺;张海丽;刘伟;冯二凯;王春霞;程悦宁
关键词:猫疱疹病毒Ⅰ型;诊断;分子生物学;等温扩增
