口蹄疫病毒O/China/99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析
文献类型: 中文期刊
作者: 潘丽;张永光;王永录;王宝琴;王文秀;方玉珍;蒋守田;张维德;董金杰;吕建亮;谢庆阁
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;O/China/99株;多基因植物;组成型表达载体;基因序列;可饲疫苗
期刊名称:中国人兽共患病杂志
ISSN: 1002-2694
年卷期: 2005 年 21 卷 10 期
页码: 841-844,905
收录情况: CSCD
摘要: 目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体。为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X与3C片段经Bam HI/SpeⅠ和SpeⅠ/SalⅠ双酶切后,与经Bam HI/SalⅠ双酶切后的pUC18质粒大片段连接,得到重组质粒pUC18/P12X3C,pUC18/P12X3C质粒经Bam HI/SalⅠ双酶切后的大片段与经同样双酶切的植物表达载体pBin438连接。转化子经酶切、PCR及测序鉴定后。获得包含FMDVO/China/99株P12X3C片段的植物组成型表达载体pBin438/P12x3C,最后通过三亲交配法,将表达载体pBin438/P12x3C导入农杆菌。结论成功构建FMDV多基因的植物组成型表达载体。
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