维氏气单胞菌噬菌体裂解酶在毕赤酵母中的表达及抑菌活性分析
文献类型: 中文期刊
作者: 张晓宇;王楠;徐时长;夏锐;药园园;冉超;张震;丁倩雯;杨雅麟;周志刚
作者机构:
关键词: 维氏气单胞菌;噬菌体裂解酶;毕赤酵母;重组表达;抑菌活性
期刊名称:中国农业科技导报
ISSN: 1008-0864
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)是水产动物养殖中常见革兰氏阴性病原菌,由于其自身产生的细胞外膜具有一定的屏蔽作用,导致多种抗生素和抗菌制剂难以将其杀灭。经生物信息学分析,从噬菌体数据库中筛选到1个具有革兰氏阴性细菌噬菌体裂解酶蛋白结构所特有的N端催化结构域和C端两亲性α-螺旋结构基序的氨基酸序列。为鉴定该氨基酸序列是否具有抑菌活性,将其编码基因按照酵母密码子优化并进行人工合成,然后转化至毕赤酵母GS115中进行组成型分泌表达,获得了重组维氏气单胞菌噬菌体裂解酶(LYS2),分泌表达量为140 mg·L-1。LYS2对维氏气单胞菌Hm091具有显著的抑菌活性,体外最小抑菌浓度为3μg·mL-1;体外最适抑菌条件为42℃、pH 4~10;在4~50℃和pH 4~7条件下可保持活性稳定;对鱼类消化道常见金属离子和蛋白酶表现出良好的耐受性。研究结果为水产动物养殖过程中维氏气单胞菌的预防与治疗提供了一种新的具有应用潜力的抗菌蛋白,为该抗菌蛋白的生产和应用奠定了理论基础和技术支撑。
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