数字农科院2.0

PB1-F2长度改变对H3N2犬流感病毒影响的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 原耀贤;李舜;何威;李康健;马春全;李守军;马骏

作者机构：

关键词： 犬流感病毒;反向遗传;定点突变;PB1-F2

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2022 年 44 卷 3 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： H3N2犬流感病毒(H3N2 CIV)是流感病毒在进化过程中新形成的一个分支,在我国多地的犬中广泛流行。PB1-F2蛋白是甲型流感病毒的毒力因子,并可能与流感病毒的跨宿主传播相关。为探究PB1-F2长度的改变对H3N2 CIV的影响,本研究分别构建了包含H3N2 CIV各基因节段的重组质粒及携带M1R(PB1-F2的aa1由M突变为R)及S^(11)Stop(PB1-F2 aa11由S突变为终止氨基酸序列)突变的重组质粒pHW-PB1-F2-M1R和pHW-PB1-F2-S^(11)Stop,并均经测序鉴定。通过反向遗传操作技术,分别拯救了如下3株重组病毒:表达90个氨基酸PB1-F2的重组亲本病毒rH3N2；不表达PB1-F2的重组病毒rH3N2-M1R；仅表达11个氨基酸PB1-F2的重组病毒rH3N2-S^(11)Stop。将这3株重组病毒利用MDCK细胞传代后分别对其8个基因节段经PCR扩增及测序以鉴定其遗传稳定性。测序鉴定结果显示,3株重组病毒均正确构建,且不同代次之间各重组病毒的基因序列及各突变位点均相同,表明本研究构建的重组病毒具有较好的遗传稳定性。将表达PB1、PB1-F2-M1R及PB1-F2-S^(11)Stop的重组质粒分别与重组质粒PB2、PA和荧光素酶报告质粒pPolI-Luci-NP及海肾荧光素酶表达质粒共转染293T细胞,48 h后利用双荧光素酶检测试剂盒检测荧光素酶活性并比较3株重组病毒的聚合酶活性；测定3株重组病毒感染MDCK细胞后不同时间的TCID50以绘制病毒的生长曲线；将3株重组病毒均以106TCID50/50μL经鼻腔感染小鼠,分析各重组病毒对小鼠的致病性。用以评价PB1-F2长度改变对H3N2 CIV的影响。结果显示,rH3N2-S^(11)Stop的聚合酶活性与rH3N2相比无明显变化,而rH3N2-M1R的聚合酶活性则显著高于rH3N2(P

分类号：

  • 相关文献

[1]H3N2亚型犬流感病毒的分离鉴定. 佘利旋,熊永忠,远立国,袁天梅,贾坤,李守军. 2011

[2]H3N2亚型犬流感病毒HA1基因的原核表达及抗原性分析. 张敦伟,熊永忠,远立国,贾坤,张桂红,李守军. 2011

[3]H3N2亚型犬流感病毒反向遗传操作系统的建立. 段旭彤,荣广玉,田巧珍,申伟霞,李雪松,陈鸿军,刘芹防,杨健美,滕巧泱,赵凯,李泽君. 2017

[4]IAV逃避免疫应答的策略. 赵朴,郑玉姝,乔传玲,贾贝贝,刘兴友. 2010

[5]A型流感病毒新蛋白PB1-F2的研究进展. 王晓杜,马志永. 2009

[6]猪流感病毒H3N2亚型PB1-F2蛋白的原核表达. 陈培君,王晓杜,罗金燕,刘超,沈阳,邱亚峰,李向东,王豪举,马志永. 2009

[7]A型流感病毒逃避免疫应答的策略. 赵朴,郑玉姝,乔传玲,贾贝贝,刘兴友. 2008

[8]Strategies Exploited by Influenza A Virus for Evading Immune Responses. Zhao Pu,Zheng Yu-Shu,Jia Bei-Bei,Liu Xing-You,Qiao Chuan-Ling. 2008

[9]Effects of PB1-F2 on the pathogenicity of H1N1 swine influenza virus in mice and pigs. Lee, Jinhwa,Henningson, Jamie,Ma, Jingjiao,Duff, Michael,Lang, Yuekun,Li, Yonghai,Li, Yuhao,Nagy, Abdou,Sunwoo, Sunyoung,Bawa, Bhupinder,Yang, Jianmei,Bai, Dingping,Richt, Juergen A.,Ma, Wenjun,Yang, Jianmei,Bai, Dingping,Nagy, Abdou.

[10]Effects Of Pb1-F2 On The P.athogenicity Of H1N1 Swine I nfluenza Virus In Mice And Pigs. Lee, J, Henningson, J, Ma, JJ, Duff, M, Lang, YK, Li, YH, Li, YH, Nagy, A, Sunwoo, S, Bawa, B, Yang, JM, Bai, DP, Richt, JA, Ma, WJ. 2017

[11]日本脑炎病毒弱毒疫苗株全长cDNA的体外合成及恢复病毒的拯救. 蒋春英,魏建超,钟登科,朱紫祥,武专昌,史子学,邵东华,李蓓蓓,马志永. 2014

[12]重组高产H1N1亚型猪流感疫苗株的构建与鉴定. 温峰,于海,黄梦,杨馥如,马继红,周艳君,李泽君,童光志. 2012

[13]甲型H1N1流感病毒株的分离鉴定以及PR8株的相关基因对重组病毒增殖能力的影响. 李建辉,刘春国,张云,刘明. 2011

[14]H9N2亚型禽流感病毒疫苗候选株的构建. 王增,冯华朋,朱鹏阳,邬丽,曾显营,邓国华,施建忠,陈化兰. 2014

[15]H3N2亚型猪流感病毒的拯救及HA与NA基因的替换. 杜金玲,刘明,刘春国,杨涛,李洪涛. 2009

[16]蓝舌病病毒10质粒反向遗传操作系统的建立. 郭运泽,孙恩成,徐青元,步志高,吴东来,王凤龙. 2019

[17]H3N2亚型猪流感病毒的拯救. 杜金玲,刘明,杨涛,刘春国,李洪涛,孙恩成,万春和,刘大飞,陈浩,齐金龙. 2008

[18]基于反向遗传操作的传染性法氏囊病新型重组疫苗研究. 祁小乐,高立,王永强,高玉龙,高宏雷,王笑梅. 2014

[19]H5N1亚型高致病性禽流感病毒A/duck/HuBei/49/05株反向基因操作系统的建立. 苏胜杰,许静,宋家升,李雁冰,希尼尼根. 2010

[20]表达不同致病型S基因重组鸡传染性支气管炎病毒的细胞嗜性研究. 姜逸,周生,俞燕,唐梦君,程旭,赵秀美. 2017

作者其他论文 更多>>