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用于牛羊肉掺假鉴定的半通用引物五重PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 陈睿;马祎芳;李学瑞;彭婕

作者机构：

关键词： 线粒体细胞色素b;五重PCR;肉种质鉴定;牛羊肉掺假

期刊名称：甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 【目的】为了建立一种快速鉴定五种动物肉类（猪、鸡、鼠、羊、牛）成分的半通用引物五重PCR（Semi-universal primer Quintuple PCR，SUP-qui-PCR）检测方法。【方法】分别提取5种肉的基因组DNA作为模板，在靶标线粒体细胞色素b基因保守区设计正向通用引物，在差异区设计5种动物特异的反向引物。反应体系50 μL，含DNA模板各1 μL，通用引物5 μL，反向特异引物配比为，猪：羊：鸡：老鼠：牛=1.2：0.6：0.5：1：0.8，2×Taq PCR StarMix 25 μL，加纯水至50 μL。反应程序为：95 ℃ 5 min，94 ℃ 30 s，57 ℃ 30 s，72 ℃延伸1 min，25个循环，72 ℃10 min。【结果】琼脂糖凝胶电泳清晰显示5条扩增条带，大小分别是137 bp、198 bp、327 bp、377 bp和499 bp，符合预期大小。经DNA模板系列稀释验证，本方法的灵敏度达0.01 ng；与其它常见的食用动物肉类（马、骆驼、鱼、兔）均无交叉反应，特异性良好；连续10次独立检测获得的扩增结果高度相似，稳定性良好。【结论】本研究建立的SUP-qui-PCR方法既可用于单纯猪肉、鸡肉、鼠肉、羊肉和牛肉及其制品的种质鉴定，也可用于最常见的猪肉、鸡肉、鼠肉冒充牛羊肉的掺假鉴定。

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  • 相关文献

[1]山东主要绵羊品种线粒体细胞色素b的多态性研究. 张传生,耿立英,杜立新. 2004

[2]山东3个绵羊品种线粒体细胞色素b基因的系统进化研究. 张传生,耿立英,李吉涛,杜立新. 2005

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