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牦牛GNAQ基因的克隆及其在雌性生殖轴系中的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 陈祎玮;褚敏;张任政;谢建鹏;马兰花;潘和平;阎萍

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关键词: 牦牛;鸟嘌呤核苷酸结合蛋白q多肽(GNAQ);生殖轴

期刊名称:农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2023 年 2 期

页码:

收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)

摘要: 鸟嘌呤核苷酸结合蛋白q多肽(G protein subunit alpha q,GNAQ)通过编码Gαq蛋白调节G蛋白偶联受体和介导下游信号通路,在营养代谢、繁殖调控以及细胞信号传导等生理过程中参与调节.为研究GNAQ在雌性牦牛(Bos grunniens)生殖轴系中的表达情况,本研究选取成年健康卵泡期雌性牦牛的下丘脑、垂体和卵巢组织,以牦牛卵巢cDNA为模板,采用逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)技术克隆得到GNAQ基因完整的CDS序列,并进行生物信息学分析;以qRT-PCR、蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法对GNAQ基因和蛋白在牦牛下丘脑-垂体-卵巢生殖轴(hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)的表达进行检测和定位.结果表明,牦牛GNAQ基因(GenBank No.OP811271)的CDS区全长1080 bp,编码359个氨基酸;牦牛GNAQ基因与普通牛(B.taurus)同源性高,与小鼠(Mus musculus)同源性较低,在物种进化过程中高度保守.经qRT-PCR、Western blot检测发现,GNAQ基因和蛋白在牦牛HPOA轴的下丘脑、垂体以及卵巢中呈现不同程度的表达,在垂体中的表达量最高,在下丘脑中表达水平显著高于卵巢(P<0.05).免疫组化结果显示,GNAQ蛋白在牦牛卵巢颗粒细胞呈强阳性表达,且主要表达于细胞质中,与亚细胞定位结果一致.本研究为深入探索GNAQ基因在牦牛生殖生理调控中的作用提供理论依据,为牦牛季节性发情调控规律及机制的研究提供参考.

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