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高活性脂肪酶的发掘、评价及在甘油二脂合成中应用

文献类型： 中文期刊

作者： 徐远志;胡珊;代思泽;游帅;郑明明;单凯

作者机构：

关键词： 脂肪酶;洋葱伯克霍尔德菌;分离鉴定;酶学性质;甘油二酯

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： EI（2025版） ; ; 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 【目的】针对国产脂肪酶催化效率低、热稳定性差等问题，筛选高活性脂肪酶菌株，解析催化特性用于酶法高效制备甘油二酯。【方法】采用中性红橄榄油平板初筛及对硝基苯酚比色法复筛的方法，从富含油脂的土壤中筛选高产脂肪酶菌株，结合形态学与16S rDNA序列分析进行菌种鉴定，通过PCR扩增获得高活性脂肪酶基因序列，探究酶学性质，建立无溶剂体系评价甘油二酯合成效率。【结果】从18份土壤样品中成功发掘到一株高产脂肪酶菌株E12C，胞外酶活为（80 826.4±1 838.9） U/L，经形态学与16S rDNA序列鉴定为洋葱伯克霍尔德菌（Burkholderia cepacia），命名为B. cepacian OCRI-Lip100，已保藏于中国典型培养物保藏中心。该脂肪酶命名为Lip-12c，最适反应温度为60℃、最适反应pH为9.0，在此条件下酶活为（190 761.2±5 181.5） U/L，比活力为（39 254.5±271.3） U/g蛋白，显著高于进口脂肪酶，在40-70℃和pH 5.0-10.0范围可维持较高活性，金属离子Na+和Mg2+对酶活性提升效果显著。在无溶剂体系中40℃酶法水解橄榄油4 h，甘油二酯含量达33.5%。【结论】土壤中发掘的高产脂肪酶菌株B. cepacian OCRI-Lip100，在无溶剂体系中展现的高效甘油二酯合成能力，不仅丰富了现有脂肪酶菌种资源库，还为功能脂质的高效生物制造提供了技术支撑。

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