数字农科院2.0

甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球作为口蹄疫病毒核酸疫苗递送载体的特性评价

文献类型： 中文期刊

作者： 李显;张中旺;张富东;吕建亮;李嘉豪;潘丽

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;甘露糖修饰的壳聚糖;壳聚糖接枝聚乳酸-羟基乙酸共聚物;纳米微球;递送载体;核酸疫苗

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2021 年 52 卷 12 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 旨在对制备的甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly（D,L-lactide-co-glycolide）,PLGA]纳米微球作为口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus, FMDV）核酸疫苗递送载体进行评价。采用西佛碱反应和元素分析制备具有一定取代度的甘露糖修饰的壳聚糖衍生物（mannose modified chitosan, MCS）,然后,经双重乳化挥发法制备得到甘露糖修饰的壳聚糖PLGA纳米微球（MCS-PLGA-NPs）。采用纳米粒径仪检测MCS-PLGA-NPs粒径分布和表面电势（zeta）、扫描电镜考察其形态、琼脂糖凝胶电泳观察其对质粒的吸附和吸附质粒后抵抗核酸酶降解能力、CCK-8法检测MCS-PLGA-NPs的细胞毒性、激光共聚焦观察巨噬细胞对MCS-PLGA-NPs-质粒DNA复合物的摄取、荧光显微镜和Western blot验证MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA在细胞中的表达。元素分析结果表明,成功制备了取代度为5%～10%的MCS。纳米粒径测定和扫描电镜结果表明,MCS-PLGA-NPs的zeta为正值、粒径分布均匀且形态规则呈球形。琼脂糖凝胶电泳结果显示,MCS-PLGA-NPs吸附质粒的能力随着其质量的增加而增强并且可以在一定程度上抵抗核酸酶降解质粒DNA。在细胞毒性试验中,不同浓度的MCS-PLGA-NPs与RAW264.7细胞共孵育24 h后,细胞存活率仍在85%以上。在细胞摄取试验中,用激光共聚焦显微镜可以明显观察到质粒DNA结合到纳米微球表面被RAW264.7细胞摄取。荧光显微镜和Western blot试验证明MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA可以在细胞中进行表达。综上表明,本研究成功制备了MCS以及具有递送核酸疫苗能力的MCS-PLGA-NPs,为FMDV核酸疫苗的递送研究提供了新的方向和见解,也为该递送载体携带特定抗原靶向抗原递呈细胞表面甘露糖受体以及应用于动物免疫的研究奠定基础。

分类号：

  • 相关文献

[1]乳源细胞外囊泡作为生物活性物质体内递送载体的研究进展. 王芳,焦阳,中拉毛草,翟欢,梁泽毅,杨晨,刘婧,陈安乐,丁学智,安彩霞. 2025

[2]羊痘病毒多表位核酸疫苗的构建及表达. 陈轶霞,刘俊林,王明明,余继英,骆学农. 2013

[3]禽流感病毒核酸疫苗脂质体的研究. 陈吉祥,李广林,薛飞群,肖华,李倬,赵荣材. 1999

[4]兔出血症病毒VP60基因真核表达质粒的构建及初步评价. 原冬伟,刘家森,郭东春,司昌德,姜骞,林欢,穆亚芳,刘行波,曲连东. 2011

[5]提高核酸疫苗免疫效果的策略. 张继乐,张杰,刘永生,高云英,孙德惠. 2008

[6]禽流感病毒HA基因核酸疫苗脂质体制备方法的研究. 陈吉祥,薛飞群,李广林,胡振英,赵荣材,于康震,陈化兰. 2000

[7]生长抑素与伪狂犬病毒gD基因的质粒DNA可使猪增重并诱导出gD抗体. 李国新,仇华吉,韩成刚,韩凌霞,周艳君,陈艳,李继昌,童光志. 2005

[8]日本血吸虫重组多表位核酸疫苗的构建与免疫保护效果评估. 章登吉,傅志强,石耀军,李浩,孙安国,彭运潮,林矫矫. 2013

[9]日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区cDNA核酸疫苗的研究. 朱建国,林矫矫,冯新港,吴祥甫,周元聪,蔡幼民. 2002

[10]口蹄疫核酸疫苗的研究进展. 王猛,刘永生,张杰. 2010

[11]柔嫩艾美耳球虫表面抗原基因的初步研究. 马卫娇,韩红玉,黄兵,姜连连,董辉,程军,赵其平,朱顺海,曾艳波. 2010

[12]细胞因子与CpG-ODN对隐孢子虫CP15核酸疫苗的佐剂效应研究. 苏庆美,何生虎,米荣升,周鹏,黄燕,张国恩,秦培兰,呼高伟,陈兆国. 2011

[13]口蹄疫基因疫苗研究进展. 郭慧琛,刘在新,孙世琪,刘光清,谢庆阁. 2003

[14]基于甲病毒复制子的犬瘟热核酸疫苗的构建及表达性研究. 孙建涛,侯绍华,于萍,朱鸿飞,梁欠,郝志明. 2013

[15]禽流感病毒H5HA、H7HA基因共表达核酸疫苗质粒的构建及其在体外的表达. 张芳芳,刘光亮,姜永萍,陈化兰,陈怀涛. 2004

[16]猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗研究进展. 张奕强,王猛,刘文倩,刘永生,张杰. 2010

[17]日本血吸虫病核酸疫苗的研究. 姚利晓,林矫矫. 2004

[18]H5N1亚型禽流感病毒HA基因核酸疫苗的构建及免疫效果研究. 陈浩,刘明,刘春国,杨涛,李洪涛,杜金玲,孙恩成. 2008

[19]含猪生长抑素与PRRS病毒GP5融合基因的质粒DNA促进猪的生长并可诱导猪产生抗GP5抗体. 李国新,仇华吉,韩成刚,韩凌霞,周艳君,陈艳,李继昌,童光志. 2005

[20]日本血吸虫中国大陆株23kDa膜蛋白核酸疫苗对猪免疫保护作用的研究. 朱荫昌,任建功,D.A.Harn,徐明,余传信,司进,叶萍,殷旭仁,何伟,许永良,曹国群,华万全1. 2002

作者其他论文 更多>>