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牛种布鲁氏菌ArsR2蛋白的原核表达及磷酸化位点鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 刘科蒙;耿好;苏梦茹;许健;支飞杰;储岳峰

作者机构：

关键词： 布鲁氏菌;arsR2基因;原核表达;蛋白纯化

期刊名称：动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2024 年 45 卷 09 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 用原核表达系统表达并纯化牛种布鲁氏菌S2308株ArsR2蛋白，软件分析该蛋白相关信息，质谱鉴定该蛋白修饰位点。以牛种布鲁氏菌S2308株基因组为模板，通过PCR扩增arsR2基因，构建pET-32a-ArsR2重组质粒，经测序正确后，转化至大肠埃希氏菌感受态细胞BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达，通过Ni-NTA亲和层析法进行ArsR2蛋白的纯化，并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定；对牛种布鲁氏菌ArsR2蛋白的理化性质和磷酸化位点进行预测，通过质谱鉴定ArsR2蛋白的修饰位点。结果显示，成功表达并纯化ArsR2蛋白，ArsR2蛋白无跨膜区，存在磷酸化修饰，质谱鉴定出ArsR2蛋白具有2个磷酸化位点。表明原核表达的牛种布鲁氏菌S2308株ArsR2蛋白存在磷酸化修饰位点，为探究该蛋白的生物学功能奠定了基础。

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