禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达
文献类型: 中文期刊
作者: 李贺;孟庆文;冉多良;于康震;陈化兰;李永强;吴东来
作者机构:
关键词: 禽流感病毒;血凝素基因;重组杆状病毒;表达
期刊名称:中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2006 年 28 卷 03 期
页码: 294-297
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis,筛选到重组质粒命名为pBlueBacHisH7HA,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经三轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA。提取重组病毒DNA,经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中,血凝实验、SDS-PAGE和Westernblot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得了表达。
分类号: S852.65
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