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绵羊肺炎支原体特异性诊断靶标筛选及其间接ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李倩倩;高鹏程;葛家振;吴晓妮;田彤彤;许健;郝华芳;郑福英;蔺国珍;储岳峰

作者机构：

关键词： 绵羊肺炎支原体;Mo pdhD;免疫原性;间接ELISA

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 本研究旨在筛选出绵羊肺炎支原体（Mo）特异性抗原靶标，并建立间接ELISA方法。利用Pull down实验结合LC-MS技术分析，筛选Mo的抗原靶标并进行表达纯化，使用Western-blot试验分析纯化蛋白的反应原性；免疫小鼠，分析蛋白免疫原性、制备免疫血清，建立基于靶标蛋白的间接ELISA方法，并对其进行性能评价。结果显示，筛选出的Mo pdhD蛋白的分子质量为71 ku，该蛋白与稀释度为1:4 000的Mo阳性血清仍可以发生反应，免疫小鼠血清效价可达1:102 400，建立的间接ELISA方法不与绵羊痘病例等的阳性血清产生交叉反应，批间及批内重复的变异系数均在12%以内，与IHA法符合率可达82.5%。可见，Mo pdhD蛋白具有良好的反应原性与免疫原性，建立的间接ELISA方法性能良好，可用于Mo的血清学诊断，为进一步研发Mo ELISA抗体检测试剂盒奠定了基础。

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