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METTL3表达水平对口蹄疫病毒复制的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 张继燕;李伟伟;范许许;曹雪静;朱兆宇;裴丹诗;王一卓;何路;李熙忠;任青峰;张伟;王川;郑海学

作者机构：

关键词： METTL3;m6A修饰;口蹄疫病毒

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 利用CRISPR/Cas9系统构建了METTL3基因敲除细胞系(BHK-21)，随后用口蹄疫病毒(FMDV)分别感染野生型和METTL3敲除BHK-21细胞，通过qPCR、Western-blot和TCID50方法检测FMDV在上述两株细胞中的复制情况。结果表明，敲除METTL3显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证METTL3的表型功能，利用慢病毒包装系统构建了METTL3稳定表达细胞系。用FMDV分别感染野生型和METTL3过表达BHK-21细胞，通过qPCR和TCID50试验测定了FMDV在这2株细胞中的复制情况。结果显示，过量表达METTL3促进FMDV的复制。此外，激光共聚焦显微镜试验显示，FMDV感染BHK-21细胞后，METTL3从细胞核迁移至细胞质，其细胞定位的改变表明METTL3可能参与调控FMDV基因组的转录过程。本研究中成功构建了METTL3基因敲除和过表达的BHK-21细胞系，首次发现该分子正向调控FMDV的复制。上述实验结果为进一步开展METTL3在宿主细胞中调控FMDV复制的机制研究奠定了可靠的数据基础。

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