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靶向FMDV基因组3B和3Cpro基因CRISPR/Cas13d转基因细胞系的构建及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 郑东东;齐晓兰;杨彪;晏子龙;郑海学;冯涛;徐红伟

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;CRISPR/Cas13d;家畜抗病;转基因

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 6 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 基因组编辑工具在抗病研究中具有巨大潜力.本研究旨在探究CRISPR/Cas13d系统在体外抗口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)研究的可行性.首先,靶向FMDV非结构蛋白3B和3Cpro的基因序列设计了 2条向导RNA(guide RNA,gRNA),并将其构建到Cas13d表达载体中;通过脂质体将表达载体转染到BHK21细胞中,再通过嘌呤霉素筛选,获得了转基因细胞系.随后,利用RT-qPCR、Western-blot以及TCID50等试验检测FMDV在转基因细胞系中的复制情况.结果显示,CRISPR/Cas13d系统显著抑制了FMDV在BHK21细胞中的复制.提示,CRISPR/Cas13d系统在口蹄疫病毒抗病研究中发挥重要作用,同时为创制具有抗病特性的家畜新品种提供了重要的理论基础,为畜禽疫病的防控提供了新的途径.

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