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里氏木霉RUT-C30内切β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的分泌表达

文献类型： 中文期刊

作者： 陈小兵;乔宇;丁宏标;岳明

作者机构：

关键词： 里氏木霉;甘露聚糖酶;毕赤酵母

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2007 年 15 卷 01 期

页码： 142-146

收录情况： CSCD

摘要： 以里氏木霉(Trichoderma reesei)RNA为模板,采用RT-PCR扩增的方法获得不带自身信号肽man1基因的cDNA片段。构建了重组表达载体pPIC9K-man1,重组质粒SacⅠ线性化后用PEG(聚乙二醇)法导入毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115中,通过PCR和表型鉴定表明,man1基因已经整合到毕赤酵母染色体上。经大量筛选,获得高效分泌表达甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株RMAN23。将此菌株在5L发酵罐中进行高密度发酵,测定酶活最高达470IU/mL,同时对重组甘露聚糖酶的性质进行了初步研究,重组酶的最适反应pH4.5,最适反应温度60℃,并且在小于75℃,pH4.0~6.0范围内有较好的稳定性。

分类号： S816.7`Q78

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