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口蹄疫病毒3D聚合酶多克隆抗体的制备与特性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张昱;王永录;张永光;方玉珍;潘丽;蒋守田;吕建亮;刘力宽;张中旺;张淑刚;李正丰;杜进鑫

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;3D聚合酶;多克隆抗体

期刊名称：中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2010 年 26 卷 01 期

页码： 6-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的表达口蹄疫病毒3D聚合酶,并制备兔抗3D多克隆抗体。方法采用PCR方法扩增口蹄疫病毒(FM-DV)3D聚合酶基因,经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切后插入pET-30a(+)原核表达载体,构建的pET-3D重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达并提取包涵体,纯化目的蛋白。然后用纯化蛋白免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,以Western blot鉴定抗体特异性,并以间接ELISA方法测定其效价。结果SDS-PAGE电泳分析显示,表达的目的蛋白约为46ku,与预期结果相符,制备的多克隆抗体效价达1∶8000以上,且具有较高的特异性。结论制备了具有高亲和性和特异性的3D聚合酶多克隆抗体,为3D聚合酶的生物学功能和抗原表位研究奠定了基础。

分类号： S852.65

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