猪带绦虫Ddi1-like蛋白的真核表达及其抗血清的制备
文献类型: 中文期刊
作者: 何伟;殷静;岳生赟;刘仲藜;王帅;才学鹏
作者机构:
关键词: 绦虫;Ddi1-like蛋白;真核表达;蛋白酶
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2017 年 5 期
页码: 582-586
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 为了对DNA损伤诱导蛋白1(Ddi1-like)基因功能进行研究,本研究参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,通过设计5′和3′端特异性引物,利用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得全长cDNA,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达;将纯化后的Ddi1-like重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果,成功利用RACE获得Ddi1-like基因的全长cDNA序列;在真核表达系统中,绦虫上的Ddi1-like重组蛋白获得表达;SDS-PAGE和Western-blot分析表明,获得重组蛋白即为Ddi1-like蛋白;免疫后获得抗血清,其效价达到1∶12 800。上述结果为后续研究Ddi1-like蛋白的酶切活性研究提供了基础。
分类号: S852.734
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