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绵羊CTLA-4胞外区对细粒棘球蚴EG95抗原的免疫佐剂作用

文献类型： 中文期刊

作者： 张雯;袁维峰;朱鸿飞;张鑫宇;夏晓莉;孙怀昌

作者机构：

关键词： 细粒棘球蚴;EG95抗原;CTLA-4胞外区;免疫佐剂作用

期刊名称：中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2010 年 26 卷 08 期

页码： 747-752+766

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的探索绵羊细胞毒性T细胞相关抗原-4(cytotoxic Tlymphocyte-associated antigen4,CTLA-4)胞外区靶向提呈羊细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)EG95抗原的可行性。方法用RT-PCR扩增CTLA-4胞外区编码序列,插入原核表达载体pET-30a获得融合表达载体pET-IgV;根据蛋白质二级结构分析结果 ,用PCR扩增EG95亲水区编码序列,将串联的3拷贝EG95编码序列分别插入表达载体pGEX-6P-1和pET-IgV,诱导重组大肠杆菌表达并纯化重组蛋白;用相同剂量的GST-3EG95、IgV-3EG95包涵体或可溶性蛋白免疫小鼠,比较EG95抗体的应答水平。结果用RT-PCR扩增得绵羊CTLA-4胞外编码区,IPTG诱导的重组大肠杆菌表达预期的约63kDa GST-3EG95和60kDa IgV-3EG95融合蛋白,两者均能被EG95抗血清识别;经两次免疫后,IgV-3EG95免疫组的EG95抗体水平显著高于GST-3EG95免疫组,可溶性蛋白的免疫效果优于包涵体。结论绵羊CTLA-4胞外区可作为分子佐剂促进细粒棘球蚴EG95抗原的抗体应答水平。

分类号： S858.26

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